摘要
目的: 巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)是一种疱疹病毒,在世界上感染非常普遍,本研究是为了建立鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)感染BALB/c裸鼠肝脏损伤的模型,为人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染免疫缺陷患者所致的肝损伤提供研究平台。 方法: 将10只雄性4周龄BALB/c裸鼠随机分为2组,每组5只。实验组裸鼠用半数细胞感染剂量(median tissue culture infective dose,TCID50)为10-6.5/0.1mL的病毒悬液250μL经腹腔注射;对照组裸鼠腹腔接种等量DMEM培养液。每日观察记录裸鼠行为表现及进食情况,第7天麻醉后处死所有裸鼠,无菌分离其肝脏,通过测定肝组织谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、荧光定量PCR检测MCMV DNA拷贝数、苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE staining)等方法,观察裸鼠肝脏组织的损伤程度。采用独立t检验比较两组间的进食量和ALT。 结果: 实验组裸鼠的反应变得迟钝、呼吸频率加快,而对照组裸鼠表现无异常;实验组裸鼠进食量明显少于对照组(t=-3.738,P=0.003),喝水量也明显少于对照组(t=-4.853,P=0.000);实验组裸鼠肝脏受损率为100%,所有实验组的裸鼠均出现了不同程度的腹水;测定的肝脏ALT值较对照组有明显上升(t=5.361,P=0.001);实验组实时荧光定量PCR检测MCMV DNA为阳性,而对照组结果为阴性;实验组裸鼠肝脏病理切片HE染色法可见大量炎症细胞浸润,肝细胞嗜酸性变,可见不规则的病毒包涵体,而对照组肝组织病理切片HE染色显示结构正常。 结论: 经腹腔注射250μL MCMV病毒悬液7天后成功构建了BALB/c裸鼠肝脏损伤的模型。