摘要
甲鱼是中国传统的营养滋补食品，随着对甲鱼成分的深入研究，发现其活性功效远超传统利用价值。已有研究发现甲鱼肽具有较好的体外抗氧化活性，但其体内抗氧化及抗疲劳的研究鲜有报道。因此，本文以甲鱼为原料，以酶解法制备甲鱼肽（soft-shelledturtlepeptide,STP），采用体外化学模型和体内动物模型综合评价甲鱼肽的抗氧化活性和抗疲劳功效，并初步探究其抗氧化活性与抗疲劳作用之间的关系。主要研究结果如下： 对制备的甲鱼肽的营养成分和相对分子质量分布进行分析，并用4种体外化学模型评价甲鱼肽的体外抗氧化活性。甲鱼肽的肽含量为87.90%，主要以1000Da以下的肽段为主，含量为93.23%。必需氨基酸含量为32.41%，与抗氧化能力密切相关的疏水性氨基酸的含量为38.81%。体外抗氧化活性结果表明甲鱼肽清除DPPH自由基、ABTS自由基及羟自由基的IC50分别为6.22mg/mL、6.63mg/mL和24.86mg/mL，总抗氧化能力为9.00μmol/g，高于乳清肽，具有一定的体外抗氧化活性。 以果蝇为模式生物，以不同剂量的甲鱼肽培养基（0.2%、0.4%和0.8%）饲喂果蝇，通过测定果蝇体内抗氧化酶活性、丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平及生存实验来评价甲鱼肽的体内抗氧化活性。结果发现，40d时，高剂量组雌、雄果蝇的超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）活力分别显著提高了28.40%和15.08%（plt;0.01），过氧化氢酶（catalase,CAT）活力分别显著提高了33.50%（plt;0.05）和38.50%（plt;0.01），MDA含量分别显著下降了33.33%和34.62%（plt;0.01）。高剂量组雌、雄果蝇的平均寿命较对照组分别延长了10.80%和14.01%，最高寿命分别延长了6.35%和13.22%。结果表明甲鱼肽具有提高雌、雄果蝇体内抗氧化活性的作用，并且能够延长雌、雄果蝇寿命。 通过小鼠力竭游泳和自由游泳实验模型，研究了甲鱼肽的抗疲劳作用，并分析潜在的抗疲劳机制。与空白对照组相比，低、中和高STP剂量组的小鼠力竭游泳时间分别延长了35.5%、57.1%和51.5%（plt;0.05），前肢抓力分别提高了20.7%、22.6%和27.6%（plt;0.05）。降低了小鼠体内代谢物乳酸（lacticacid,LA）、尿素氮（ureanitrogen,BUN）和血氨（NH3）水平。增加了血糖（bloodglucose,Glu）、肌糖原（muscleglycogen,MG）和肝糖原（liverglycogen,LG）含量，减少了乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase,LDH）和肌酸激酶（creatinekinase,CK）外渗，保护肌肉组织免受损伤。同时，甲鱼肽显著提高了肝脏中SOD和GSH-Px的活力，降低了MDA水平并上调了Nrf2和HO-1蛋白的表达，下调了Keap1的表达。结果表明，甲鱼肽通过激活Nrf2/Keap2信号通路，抑制机体的氧化应激，从而发挥抗疲劳作用。
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