摘要
大黄鱼(Larimichthyscrocea)是我国重要的经济鱼类，随着养殖密度增加、规模扩大，养殖病害严重制约了养殖产业的健康发展。内脏白点病(Visceralgranulomasdisease，VGD)是大黄鱼养殖过程中主要的细菌性病害，具有较高死亡率与发生率，其致病菌为杀香鱼假单胞菌(Pseudomonasplecoglossicida)。目前，疫苗接种是防治细菌性疾病的有效方式，因此，亟需开发针对大黄鱼内脏白点病的疫苗候选产品。灭活疫苗安全性高、研发周期短，成为鱼用疫苗开发的首选。但是，免疫保护效果较弱是灭活疫苗的主要缺陷，因此在实际研发中，筛选并添加佐剂是提高疫苗免疫效果的主要方式。 课题首先以大黄鱼为实验动物，建立杀香鱼假单胞菌感染模型，便于后续疫苗免疫保护效力相关评价。其次，将水性的铝胶佐剂(Alhydrogel，AH)和油性的763A佐剂与灭活菌液联用制备灭活疫苗，利用大黄鱼考察疫苗免疫保护效力及佐剂副作用。结果表明，AH佐剂疫苗与763A佐剂疫苗对大黄鱼均有一定的免疫保护，但效果较差。注射763A佐剂疫苗的大黄鱼肠道黏连现象明显，且免疫期间死亡较高，相比之下，AH佐剂是安全的。随后，以AH佐剂复配多抗甲素(PolyactinA，PA)和CpG质粒，制备灭活疫苗并接种大黄鱼，对杀香鱼假单胞菌的相对免疫保护率(Relativepercentagesurvival，RPS)达64％。分析大黄鱼体内适应性免疫应答，PA和CpG显著激活大黄鱼细胞免疫应答，但体液免疫激活较弱，推测细胞免疫在大黄鱼抵抗杀香鱼假单胞菌感染过程中发挥重要作用。 综上所述，本课题将不同佐剂与杀香鱼假单胞菌灭活菌液联用制备灭活疫苗，通过对疫苗安全性和免疫保护效果进行评价，筛选具有增强杀香鱼假单胞菌灭活疫苗免疫保护效果的佐剂组分，并进一步对疫苗激发鱼体的免疫应答机制进行初步解析。不仅有望解决当前大黄鱼养殖产业对内脏白点病防御性疫苗产品的迫切需求，还为针对大黄鱼其他养殖病害的疫苗产品开发提供有效的佐剂配伍组合。
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