摘要
中国卤虫(Artemiasinica)对环境有很强的自适应能力,当遭遇外部不利条件时其自身能够产生滞育卵以抵御环境,当外部条件再度适宜生长时,其胚胎能够打破滞育从而继续发育。TFDP-1是转录因子(Transcriptionfactors)DP家族重要一员,它能与转录因子E2Fs通过特异性序列结合,形成异源二聚体,使E2F与DNA的结合能力大为增强,如此以来结合体能够调控其下游靶基因的转录继而调控细胞周期,并且是细胞再生的关键蛋白。相关研究表明TFDP-1对中国卤虫解除滞育有重要作用,但在胚胎重启动的过程中的相应机制还是未知的。 本研究采用了PCR和RACE技术首次成功得到了中国卤虫的TFDP-1基因,其基因全长为712bp,开放阅读框(ORF)总长420bp,可编码氨基酸139aa,蛋白的分子量为15.7KDa,理论等电点为7,是不跨膜的亲水蛋白,亚细胞定位预测有大量的TFDP-1在细胞核内表达,胞质、内质网、内分泌囊泡中也有一定表达,经SMART在线预测其含有一个DP结构域。通过实时荧光定量PCR和Western免疫印迹可知TFDP-1的基因与蛋白表达量受中国卤虫的发育时段、所处盐度和温度影响,在环境不适于卤虫生长时TFDP-1迅速下调表达水平以应对即将到来的危害;当环境适宜时,再度将表达提升到一定水准,从而控制其下游靶基因激活细胞周期的进行。本文对关键的细胞周期蛋白TFDP-1有了进一步的研究,对卤虫滞育胚胎的重启动有了深一层的认知,为人类揭开抗逆性、细胞生长发育机制的神秘面纱提供了科学依据。