摘要
目的：通过研究甘麦大枣汤对注意缺陷多动障碍模型动物——SHR大鼠行为学变化、前额叶皮质层损伤以及肠道菌群分布的影响，探究本方治疗ADHD的作用机制与“脾藏意”理论的联系。 方法：使用随机数字表法将SHR大鼠分为甘麦大枣汤组（7.3g/kg）、利他林组（0.02mg/kg）和模型组，每组8只，另将WKY大鼠8只设为空白对照组。适应性饲养7天后，每组大鼠分别灌胃21天，进行为期6天的Morris水迷宫实验，评估药物对SHR大鼠学习能力、冲动、多动行为的影响；通过HE染色、TUNEL染色观察大鼠前额叶皮质层病理形态变化；通过Western Blot法与RT-qPCR检测前额叶皮质层DRD1和DRD2蛋白与mRNA表达变化；通过16s高通量测序检测药物对肠道菌群分布的影响。 结果：1.大鼠Morris水迷宫行为学变化的比较 与空白对照组相比，模型组平均潜伏期时间延长，目标象限停留时间缩短，平均速度加快，总路程延长，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组相比，甘麦大枣汤组和利他林组平均潜伏期缩短，目标象限停留时间延长，穿越平台次数增多，平均速度减慢，总路程缩短，差异有统计学意义（P＜0.05）。 2.大鼠前额叶皮质层病理形态观察的比较 空白对照组大鼠可见锥体细胞排列紧密，层次分明，结构有序，细胞形状规则，细胞核清晰可见，呈现深染，神经元细胞数量多，未观察到凋亡细胞；模型组大鼠见锥体细胞排列稀疏，层次不清，结构混乱，细胞形状不规则，细胞结构大多不清晰，神经元细胞数量较少，排列不齐，结构不完整，可见大量凋亡细胞；甘麦大枣汤组和利他林组可见锥体细胞排列较为紧密，层次比较分明，结构有序，细胞形状大多规则，细胞核多数清晰可见，呈现深染，神经元细胞数量尚可，排列比较整齐，结构较为完整，可见少量凋亡细胞。 3.大鼠前额叶皮质层DRD1与DRD2蛋白和mRNA表达水平的比较 与空白对照组比较，模型组DRD1和DRD2的蛋白表达和mRNA表达水平显著下降（P＜0.05）；与模型组比较，甘麦大枣汤组和利他林组大鼠DRD1和DRD2的蛋白表达和mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）。 4.大鼠肠道菌群变化的比较 空白对照组与其他三组之间粪便物种多样性存在较大差异；模型组与甘麦大枣汤组、模型组与利他林组之间粪便物种多样性存在一定差异；甘麦大枣汤组与利他林组之间粪便物种多样性差异较小。 在大鼠粪便菌群结构组成分析中，空白对照组、甘麦大枣汤组、利他林组与模型组的大鼠肠道菌群重合度从门到属下降，差异性增大。 与模型组相比，甘麦大枣汤组与利他林组中的肠道菌群发生显著变化，主要体现为甘麦大枣汤组与利他林组拟杆菌门的增多与厚壁菌门的减少，提示甘麦大枣汤与利他林确实影响了SHR大鼠肠道菌群的分布。 结论：甘麦大枣汤可以有效改善SHR大鼠关于ADHD的核心症状，缓解前额叶皮质层损伤，上调DRD1、DRD2表达的同时影响肠道菌群的分布，进一步丰富和发展了“脾藏意”理论的内涵，为ADHD的中医治疗提供新的思路。
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