摘要
目的： 探究跨膜转运蛋白39A（transmembraneproteins39A，TMEM39A）基因单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）与原发性胆汁性胆管炎（primarybiliarycholangitis，PBC）、系统性红斑狼疮（systemiclupuserythematosus，SLE）及桥本氏甲状腺炎（hashimoto''sthyroiditis，HT）的发病是否相关，并分析TMEM39A单核苷酸多态性及其表达蛋白与PBC、SLE及HT相关临床指标关系，发现TMEM39A在PBC、SLE及HT的诊断及预后的判断中可否发挥作用。 方法： 1.收集PBC组、SLE组、HT组及对照组外周静脉血，分离血浆和血细胞,用全自动核酸提取仪提取血细胞中的DNA；2.收集PBC组、SLE组及HT组患者的各项临床症状指标；3.应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法（matrixassistedlaserdesorptionionizationtimeofflightmassspectrometry，MALDI-TOFMS）检测筛选出的TMEM39A基因10个SNP（rs1132200、rs12493175、rs2282175、rs7629750、rs3732421、rs6438528、rs11713200、rs7613562、rs9858137、rs9713715）的基因型；4.使用酶联免疫吸附测定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）技术检测TMEM39A蛋白在外周血中的表达水平；5利用SPSS统计软件分析TMEM39A基因的多态性、外周血TMEM39A蛋白表达水平与各组临床指标之间的关系。 结果： 1.在PBC组，TMEM39A基因rs9858137位点T等位基因频率及基因型CT的频率高于对照组（分别为12.86%vs0%，25.71%vs0%），且差异有统计学意义（Plt;0.05），TMEM39A基因rs9713715位点PBC组基因型CT频率高于对照组（71.43%vs51.61%），差异有统计学意义（Plt;0.05）。 2.在PBC患者中，rs9713719位点基因型为CT的抗Ro52阳性率比基因型CC的阳性率低（26.09%vs70%）,且差异有统计学意义（Plt;0.05）。rs3732421位点基因型GG的患者外周血总胆红素（totalbilirubin、TBIL）、直接胆红素（directbilirubin、DBIL）浓度高于基因型为AG、GG的患者（39.3(26,101.6)vs16.8(8.8,25.8)vs14.1(10.2,15.4)umol\L、28.4(11.3,91.5)vs9.3(3.8,12.5)vs6.6(4.2,9.1)umol\L），且差异有统计学意义（Plt;0.05）。rs3732421位点基因型为GG的患者脾大与腹水的阳性率高于基因型为AG、AA患者的阳性率（100.00%vs30.00%vs25.00%、100.00%vs20.00%vs25.00%），且差异有统计学意义（Plt;0.05）。 3.在HT患者中，TMEM39A基因rs7613562位点、rs7629750位点及rs9713715位点杂合子基因型首次发病年龄比另外两种纯合子基因小（分别为24（19.5，33）vs45（29，52.5）vs31（38，48.5）,23（15.75，28）vs45（29，52.5）vs34（25，45），23（17.5，31.5）vs45（29，52.5）vs35（25，46.75）），且差异有统计学意义（Plt;0.05）。 4.PBC组、SLE组TMEM39A外周血浓度（9.705(8.125,11.540)ng/L、8.655（7.905,9.435）ng/L）显著高于对照组（8.13（7.055,8.485）ng/L）,且差异有统计学意义（Plt;0.05），HT组外周血TMEM39A浓度与对照组的差异无统计学意义（Pgt;0.05）。 5.在PBC组，抗GP210阳性组外周血TMEM39A浓度显著高于阴性组（11.71(10.285,12.72)ng/Lvs8.490(7.900,10.935)ng/Lng/L,Plt;0.05）。ANA高滴度（≥1:320）组外周血TMEM39A浓度显著高于ANA低滴度（lt;1:320）组（分别为11.450（9.355,17.75）ng/Lvs8.59（7.850,10.760）ng/L,Plt;0.05）。 6.在SLE患者中，抗nRNP/Sm、抗Sm及抗核糖体核蛋白阴性组外周血TMEM39A浓度大于阳性组（分别为9.065（8.44,10.07)ng/Lvs8.865（8.315,9.39）ng/L、8.805（8.16,10.035）ng/Lvs7.935（7.075,8.88）ng/L、8.94（8.655,10.07）ng/Lvs7.81（6.695,8.225）ng/L），且差异有统计学意义（Plt;0.05）。外周血TMEM39A浓度与抗dsDNA浓度呈正相关(R=0.471，P=0.011）。 7.在HT患者中，外周血TMEM39A浓度与游离三碘甲状原氨酸(freetriiodo-thyronine，FT3)、血清游离甲状腺素(freethyroxine，FT4)呈正相关（R=0.356，P=0.033；R=0.443,P=0.007）。 结论： 1.TMEM39A基因多态性位点rs9858137、rs9713715同PBC的易感性相关，但同SLE和HT的发病无关；rs1132200、rs12493175、rs2282175、rs7629750、rs3732421、rs6438528、rs11713200、rs7613562与PBC、SLE及HT的发病无关。 2.TMEM39A蛋白在PBC患者外周血浓度高于对照组，且浓度越高，预后越差；rs9713715位点基因型CC的PBC患者，组织学分期更晚；rs3732421位点基因型GG的PBC患者预后较差，进展到肝脏失代偿期的可能性较大。 3.TMEM39A在SLE患者外周血内浓度高于对照组，其浓度越高，则处于活动期症状越重。显示TMEM39A的表达可能与SLE的肾脏、神经系统、肝脏病变及其他临床症状有关。 4.TMEM39A在HT患者外周血内的浓度与对照组无显著差异，尚不支持TMEM39A与HT的发病有关。HT患者TMEM39A外周血浓度与FT3、FT4浓度同步升高，TMEM39A基因的3个SNP（rs7613562、rs7629750及rs9713715）的杂合子基因型HT患者预后比纯合子基因型HT患者预后差。
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