摘要
背景：微卫星不稳定（MicrosatelliteInstability，MSI）是肿瘤细胞内的微卫星由于重复单位的插入或缺失而导致其长度发生变化。研究表明，MSI与肿瘤发生及预后密切相关；免疫检查点抑制剂对微卫星高度不稳定的胃癌具有良好治疗效果。 目的：研究微卫星状态与胃癌预后及临床特征的相关性；研究免疫检查点抑制对微卫星高度不稳定胃癌患者的疗效，再筛选免疫相关基因和免疫细胞，建立MSI胃癌免疫相关风险预测模型。 方法：1.通过循证医学方法，检索CNKI、CBM、WanFangData、VIP、PubMed、WebofScience、TheCochraneLibrary和EMbase中英文数据库中有关MSI与胃癌预后的系统评价，筛选并提取资料后采用AMSTAR2量表评价方法学质量，通过RevMan5.4.0软件对纳入研究的生存数据进行Meta分析。 2.通过临床流行病学方法，回顾性收集2013年12月至2019年12月就诊于兰州大学第二医院的胃癌临床资料及MSI检测结果。分析微卫星状态与胃癌临床病理特征的相关性。 3.通过循证医学方法，计算机检索英文数据库，筛选免疫检查点抑制剂与MSI-H胃癌预后相关的临床研究，提取信息后使用RevMan5.4.0软件对生存数据进行Meta分析。 4.通过生物信息学方法，基于TCGA数据库筛选并下载胃癌转录组数据。筛选MSI-H和MSS/MSI-L胃癌之间差异表达的基因，对差异表达的免疫基因进行GO和KEGG分析，定量分析肿瘤免疫浸润。建立免疫相关风险预测模型。评估该模型对生存的预测能力及其与预后的相关性。 结果：1.经过筛选共纳入5篇系统评价，28756例胃癌患者，其中MSI-H胃癌3066例（10.66%），MSS/MSI-L胃癌25690例（89.34%）。Meta分析结果表明，MSI-H胃癌患者的总体生存优于MSS/MSI-L胃癌患者（HR=0.72,95CI%[0.61,0.85],Plt;0.05）。5篇临床研究报告了MSI与胃癌无病生存的影响，Meta分析结果表明，MSI-H胃癌患者DFS优于MSS/MSI-L胃癌患者（HR=0.89,95CI%[0.87,0.91],P=0.03）。 2.临床研究共纳入759例胃癌患者，其中MSI胃癌患者46例（6.1%），MSS为713例（93.9%）。结果表明，微卫星不稳定发生率与胃癌患者的年龄，肿瘤分化程度，TNM分期，淋巴结转移等密切相关。在预后方面，TNM分期为I/II的胃癌患者中，MSS患者的预后优于MSI，而在III-IV期MSI患者预后优于MSS患者，但差异无统计学意义；淋巴结转移阳性的MSI胃癌患者，其OS优于MSS胃癌患者，差异有统计学意义。 3.共纳入3篇临床研究，分析了免疫治疗与MSI-H胃癌预后的相关性。Meta分析结果表明，基于帕博利珠单抗的治疗方案对MSI-H的进展期胃癌具有良好的治疗效果，可有效延长总体生存（HR=0.52,95CI%[0.28,0.95],Plt;0.05）。 4.从TCGA中筛选出371例胃癌样本，包括53例MSI-H胃癌样本和318例MSS/MSI-L胃癌样本。GO和KEGG功能富集分析结果表明，差异表达的免疫基因积极参与了细胞因子受体间相互作用和神经活性配体-受体相互作用KEGG途径，GO分析结果显示，细胞组分主要富集在分泌颗粒内腔，分子的功能在受体配体活性上富集，生物过程主要富集在体液免疫中。通过CIBERSORT算法研究MSI-H和MSS/MSI-L胃癌样本中免疫细胞的表达情况，发现活化的CD4+记忆性T细胞，调节性T细胞，自然杀伤细胞，M0型巨噬细胞，M1型巨噬细胞，肥大细胞和中性粒细胞差异表达。 经筛选得到312个差异表达的免疫基因，包括29个上调和283个下调的基因；通过单因素和多因素COX分析后筛选出2个免疫基因，分别为BPI和EGF。结合基因表达值及回归系数建立免疫相关风险预测模型。根据风险得分将样本分组，生存分析结果显示，低风险组的预后明显优于高风险组；且预测能力良好。 结论：1.MSI与胃癌预后相关性的系统评价再评价表明，与MSI-L/MSS胃癌患者相比，MSI-H胃癌患者的OS和DFS延长，预后更好； 2.临床研究结果表明，晚期胃癌中，MSI发生率更高，且预后更好； 3.对进展期的MSI-H胃癌患者，使用免疫检查点抑制剂治疗可有效延长生存时间； 4.MSI-H胃癌的肿瘤微环境可能通过多种免疫细胞影响机体的体液免疫。BPI和EGF可作为独立预后因子有效影响胃癌患者的预后；以BPI和EGF基因为基础构建的免疫风险预测模型具有预测MSI胃癌预后的作用。
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