摘要
目的： 研究TMEM106B的表达对恶性脑膜瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响，与PI3K/AKT信号通路活化的关系，并探讨其在脑膜瘤发生发展中的作用。 方法： 1.通过慢病毒感染恶性脑膜瘤IOMM-Lee细胞株和CH157细胞株，分别构建沉默和过表达TMEM106B的细胞株。每株细胞株分为五组：空白对照组（Blank），沉默阴性对照组（NC-sh），沉默TMEM106B组（TMEM106B-sh），过表达阴性对照组（NC-ox），过表达TMEM106B组（TMEM106B-ox）。使用RT-qPCR和Westernblot方法来检测不同组细胞TMEM106B在mRNA和蛋白水平上的表达。 2.通过CCK8、MTT细胞增殖实验检测各组细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡情况。 3.通过划痕实验、Transwell实验观察各组细胞迁移和侵袭情况。 4.Westernblot法检测各组细胞中TMEM106B、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达水平。 5.采用SPSS22.0统计软件分析数据，所有数据均以三次重复实验的均数±标准差，比较两组之间的差异用t检验，比较多组间数据用方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。 结果： 1.RT-qPCR法检测各组细胞TMEM106BmRNA表达水平：IOMM-Lee细胞和CH157细胞中均能检测到TMEM106BmRNA的表达，沉默组表达量下降，而过表达组表达量增加。Westernblot法检测各组细胞TMEM106B蛋白表达水平发现：沉默组中TMEM106B蛋白表达量下降，而过表达组中则相反，达到分组要求。 2.CCK8、MTT细胞增殖实验的结果表明：TMEM106B沉默组细胞增殖能力降低，而过表达组细胞增殖能力升高，差异有统计学意义（P＜0.01）。流式细胞术检测结果显示：TMEM106B过表达的细胞中，处于G0/G1期的细胞数量减少，处于S期的细胞数量增加，沉默组恰好相反；TMEM106B沉默组细胞凋亡增加，而过表达组细胞凋亡降低。 3.划痕实验、Transwell实验表明：细胞迁移、侵袭能力会随着TMEM106B表达的增加而增强。 4.沉默和过表达TMEM106B，PI3K、p-PI3K、p-AKT蛋白的表达水平也随之降低或升高（P＜0.05）。 结论： 1.TMEM106B的过表达能促进恶性脑膜瘤细胞增殖，并增强脑膜瘤细胞的迁移和侵袭能力。 2.TMEM106B能促进细胞周期从G0/G1期向S期的转变，且能抑制细胞凋亡。 3.TMEM106B能促进PI3K/AKT信号通路的活化，这或许是TMEM106B影响恶性脑膜瘤细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的一种途径。
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