摘要
细胞计数在基础科学研究和临床医学领域均具有重要的意义。在基础科学研究中,介观图谱构建需要对注射逆行示踪剂的大脑的各个区域进行细胞计数,通过细胞的数量反映各区域的连接强度。而在临床医学领域,一些常规的检查需要对样本特定的某种细胞进行计数,例如血常规中的红细胞与白细胞数目等。而在当前的图谱绘制领域,细胞数量主要通过人工计数的方法获得,大量的计数人员对神经细胞图像进行计数,不但需要大量的时间和人力物力,同时多人计数情况下,个体之间的标记误差不可避免。这些问题直接或间接的影响了介观脑图谱的绘制,因此开发基于荧光显微图像的自动化细胞计数方法在提升细胞识别的准确率、提高细胞计数的速度、降低人工成本等方面具有重要的意义。 本论文提出了从数据获取到数据处理最后进行细胞计数的一系列流程和方法。数据获取阶段提出了ROI选取算法通过选取单层图像的ROI进而对ROI区域进行多层扫描来提升扫描的速度并减小空间的占用。同时该算法提出的亮度与颜色自适应调节方法同样应用于之后深度学习的训练数据的获取,保障了图像的清晰。在细胞计数阶段,本文设计了基于注意力机制和对抗网络的深度学习结构,在经典的U-Net上引入结合空洞卷积的特征增强模块、基于通道注意力机制的特征选择模块、基于注意力机制的像素级特征融合模块,设计了本文的密度图回归网络DCAU-Net,最后使用对抗网络进行约束保证密度图分布的一致性得到训练的整体框架ADCAU-Net。为了验证我们的细胞计数自动化算法的有效性,我们在合成细菌细胞、骨髓细胞、结肠癌细胞和猕猴脑神经细胞四种细胞的数据集上进行了验证并与U-Net、FCRN、Count-Ception三种算法进行了对比,结果表明我们的算法在大多数数据集中表现均好于其他算法,尤其是猕猴脑神经细胞图像。最后我们对论文中提出的各模块进行了消融实验说明我们的模型各模块的重要性和必要性。 我们提出的算法可以准确、快速、有效的自动化预测细胞数量,为各种需要细胞计数的科学研究提供方法支持,为科研人员带来了极大便利。