摘要
背景:程序性细胞死亡配体1(PD-L1)在肿瘤细胞中过高表达，导致肿瘤细胞逃避T细胞杀伤，促进肿瘤细胞存活、增殖、迁移、侵袭和血管生成。旋复花内酯是一种具有抗癌活性的天然产物。然而，旋复花内酯是否通过影响PD-L1产生抗肿瘤作用尚未被研究。 目的:本研究探讨了旋复花内酯是否通过抑制肿瘤细胞中PD-L1的表达起到抗癌作用。 方法:1.在体外实验中采用MTT法、同源性建模和分子对接、RT-PCR、免疫印迹实验探讨旋复花内酯对PD-L1表达的影响。2.使用同源性建模和分子对接、免疫印迹、免疫荧光实验探讨了旋复花内酯对HIF-1α与Myc的影响以及其分子机制。3.免疫印迹、免疫荧光和免疫共沉淀检测HIF-1α与Myc在旋复花内酯影响PD-L1表达中的作用。4.分别采用T细胞杀伤实验、EdU标记、集落形成、流式细胞术等方法分析旋复花内酯对肿瘤杀伤活性、细胞增殖、细胞周期的影响。5.通过划痕实验、侵袭实验、小管形成等方法检测旋复花内酯对迁移、侵袭和血管生成的影响。6.在体内实验中，评估旋复花内酯对HCT116细胞异种移植瘤的抗肿瘤活性。 结果:1.旋复花内酯通过抑制PD-L1蛋白的合成而降低肿瘤细胞PD-L1的表达，但不影响PD-L1蛋白的降解。2.旋复花内酯还通过mTOR/P70S6K/eIF4E途径抑制HIF-1α的表达，通过Ras/RAF/MEK/ERK途径抑制Myc的激活。3.旋复花内酯通过阻断HIF-1α与Myc的相互作用来抑制PD-L1的表达。4.旋复花内酯通过抑制PD-L1，增强T淋巴细胞的活性，抑制肿瘤细胞增殖。5.旋复花内酯通过抑制PD-L1抑制血管生成。6.在裸鼠异种移植瘤模型中证明了旋复花内酯的抗肿瘤活性，证实了体内观察到的结果。 结论:旋复花内酯通过阻断HIF-1α与Myc的相互作用而抑制PD-L1的表达。此外，旋复花内酯通过抑制肿瘤中的PD-L1来增强T细胞活性并抑制肿瘤增殖和血管生成。目前的研究内容证明了旋复花内酯的抗肿瘤作用，为抑制PD-L1治疗癌症提供了新的思路。
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