摘要
目的： 系统阐明复方扶芳藤合剂中的化学成分组成，建立一种对中成药复杂成分可实现快速鉴定并准确定量分析的高效分析方法。 方法： 1.建立基于超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)的高分辨率筛查方法，采用Thermo Gold C18色谱柱（2.1mm×100mm，1.9μm）分离，以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速0.3mL/min，质谱采用正负离子同时采集模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描模式，对复方扶芳藤合剂中的化学成分进行定性分析，通过UPLC-Q-Orbitrap HRMS扫描提供的化合物精确相对分子质量、多级碎片离子信息，结合相关文献及利用Compound Discoverer和TraceFinder等软件进行数据分析最终实现对中成药中复杂且未知化合物的快速、准确定性。 2.建立采用UPLC-Q-Exactive超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定复方扶芳藤合剂中多组分含量测定的方法，色谱条件为采用Thermo Gold C18色谱柱（2.1mm×100mm，1.9μm）分离，以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速0.3ml/min，质谱采用HESI离子源，利用其高分辨率，使用一级Full mass并打开特定离子模式，通过正负离子同时扫描的方式进行定量。 3.通过建立的含量测定方法与常见的三重四级杆串联质谱（QQQ）和四级杆/飞行时间高分辨质谱(Q-TOF)进行对比，从线性、定量限、样品测定结果多方面进行对比。 结果： 1.通过高分辨数据从复方扶芳藤合剂中共鉴定出38个化学成分，包括黄酮类11个、萜类10个、有机酸类8个、酚类2个、糖及糖醇类3个、氨基酸及核苷类4个。 2.定量的13个组分没食子酸、焦性没食子酸、原儿茶酸、葛根素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷RF、人参皂苷Ro、黄芪甲苷、芒柄花素分别在10.13～1013、13.41～1341、16.62～1662、1.28～128、12.20～1220、12.21～1221、15.73～1573、12.01～1201、11.08～1108、13.15～1315、10.93～1093、9.68～968、11.94～1194ng/mL线性关系良好(r＞0.9991)；精密度、重复性及稳定性良好（RSD＜3.0%）；加样回收率在95.1～101.2%之间，RSD均小于3.0%；本研究所测成分在10批次样品中的质量分数依次为没食子酸6.999～14.018μg/mL、焦性没食子酸2.197～3.305μg/mL、原儿茶酸11.279～17.209μg/mL、葛根素0.101～1.009μg/mL、毛蕊异黄酮葡萄糖苷7.449～16.821μg/mL、阿魏酸4.067～12.200μg/mL、人参皂苷Re9.836～16.306μg/mL、人参皂苷Rg113.977～29.039μg/mL、人参皂苷Rb124.297～43.452μg/mL、人参皂苷RF6.073～8.201μg/mL、人参皂苷Ro19.157～29.791μg/mL、黄芪甲苷57.632～92.299μg/mL、芒柄花素7.512～10.081μg/mL。 3.四级杆/静电场轨道阱质谱的线性范围适用性最好；灵敏度比Q-TOF要好，稍差于QQQ；含量结果对比中明显优于Q-TOF。 结论： 建立的定性方法可快速、准确、系统的识别出复方扶芳藤合剂中多种化学成分，建立的定量方法灵敏度高、准确性好，方法学考察结果符合要求，可用于复方扶芳藤合剂中多种组分进行系统的快速测定，为该制剂质量控制、药效物质基础研究及进一步的临床应用提供了扎实的理论依据及研究思路并为其整体药物质量评价的提供了新的科学依据及参考。
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