摘要
植物多酚具有抗氧化、抗癌、抑菌抗病毒、抑制心脑血管疾病等多种生物活性，一直是食品、生物、医学等领域的研究热点。高粱含有丰富的天然抗氧化活性物质，本文以高粱中的酚类物质为研究对象，开展了高粱中酚类物质的提取和纯化条件优化研究，测定和比较了不同高粱品种的抗氧化活性，使用高效液相色谱-高分辨质谱联用技术，对高粱中的酚类物质进行分析和鉴定，并对不同品种中多酚物质的差异性做了系统的分析。 第一章介绍了高粱活性物质以及国内外研究现状，提出了本课题的研究意义以及研究内容。 第二章采用正交实验，确定了丙酮-水溶液为最佳的提取溶剂，高粱多酚单级萃取的最佳条件为：使用40%的丙酮作为溶剂，液料比为1:40，在50℃的水浴下提取120min。对高粱提取液纯化条件进行了优化，得出最佳上样浓度20mg/mL，上样流速为2BV/h；最佳洗脱溶剂为80%的乙醇，洗脱速率为2BV/h，洗脱体积为2BV，确定了最佳的纯化条件。实验结果确定了高粱中的酚类物质主要是酸酯类多酚。 第三章开展了27种高粱提取物抗氧化活性测定工作，总还原力、OH自由基清除率最高的高粱品种是HB13，总还原力EC50值约为190mg/L；OH自由基清除率在200mg/L时清除率为53.64%。DPPH清除率最高的高粱品种是DB11，样品浓度为10mg/L时，DPPH自由基清除率为75.57%。对抗氧化活性与多酚含量进行相关性分析，相同多酚浓度下抗氧化活性较高的高粱品种主要有DB1、DB6、HB4、DB12、HB5、HB12、HB13、XN2以及XN1等高粱样品，这些样品抗氧化活性较强，在后续的酚类物质定性中均发现儿茶素及其低聚缩合物原花青素B1和黄烷-3-醇，说明相同多酚浓度下含有儿茶素、原花青素和黄烷三醇的高粱品种，其抗氧化活性可能高于其他不含这些酚类物质的品种。相同多酚浓度下抗氧化活性较低的高粱品种大多含有较低的多酚含量。说明高粱样品的抗氧化能力除了与活性物质含量有关外也与活性物质的种类有关。 第四章对冻干样品进行了HPLC-MS、HPLC-MS/MS分析，在正离子模式下鉴定了18种花青素类物质。所检测的19组样品中均检测到了芹菜定和木犀草定这两种花青素类物质，15种样品中检测到芹菜定-5-葡糖苷衍生物和柚皮素；高粱样品在负离子模式下鉴定出的20种多酚类物质。所有的样品中均检测到了水杨酸和咖啡酸两种酚酸类物质，另外检测出多种酚酸及其衍生物。此外，在DB1、DB6、HB4、DB12、HB5、HB12、HB13、XN2以及XN1等高粱样品中发现儿茶素及其低聚缩合物原花青素B1和黄烷-3-醇，证实国内培育的高粱品种大部分含有较高的多酚，这可以为高粱中提取多酚类物质提供基础数据和理论上支持。 经检测，高粱中含有多种酚类物质，表明高粱将有可能成为提取酚类物质的重要原料，研究酚类物质在不同高粱品种中的存在和分布情况将为相关物质的开发利用提供参考价值。
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