摘要
结肠癌在人群中的发病率日渐升高，死亡率也居高不下，成为威胁人类健康的重大疾病之一。结肠癌的转移是其死亡率高的重要原因，大约一半的结肠癌患者会出现肝转移，而且手术成功病人的5年生存率也只有40％左右。因此，了解结肠癌及其转移机制对于预防和治疗结肠癌是十分关键的。狐猴酪氨酸激酶2(LMTK2)虽然命名为酪氨酸激酶，但是研究表明其具有丝氨酸苏氨酸激酶活性。目前关于LMTK2的研究不多，主要集中在神经退行性疾病和前列腺癌方面，而对于结肠癌的影响研究还很少。我们课题组前期研究发现LMTK2具有促进结肠癌细胞生长的作用，但该蛋白在结肠癌细胞转移侵袭中的作用还不清楚。因此，在本研究中我们探讨了LMTK2在结肠癌细胞转移侵袭中的作用和分子机制。细胞实验表明，敲减LMTK2促进结肠癌HCT116和RKO细胞的迁移侵袭能力，而过表达LMTK2则抑制上述结肠癌细胞的迁移侵袭能力。过表达激酶失活突变的LMTK2也可以抑制上述结肠癌细胞的迁移侵袭能力，即LMTK2抑制结肠癌细胞迁移侵袭不依赖其激酶活性。小鼠实验结果显示，敲减LMTK2显著提高HCT116细胞的肝脏转移能力。这些结果表明，LMTK2发挥抑制结肠癌细胞迁移和侵袭的作用。我们发现敲减LMTK2诱导p38MAPK的磷酸化，而过表达LMTK2则抑制p38的磷酸化，过表达激酶失活突变的LMTK2同样抑制p38的磷酸化。结果表明LMTK2抑制p38磷酸化，而且这种作用不依赖其激酶活性，这与激酶失活突变的LMTK2可以抑制结肠癌细胞的迁移侵袭结果相一致。由于p38在肿瘤细胞转移过程中发挥重要作用，我们推测LMTK2可能通过p38发挥抑制结肠癌细胞的迁移侵袭的功能。我们发现抑制p38活性或敲减p38可以阻止因敲减LMTK2对结肠癌细胞迁移侵袭的促进作用，表明LMTK2通过p38抑制结肠癌细胞的转移。我们进一步探讨了LMTK2抑制p38磷酸化的分子机制，发现LMTK2可以结合p38，和p38的上游激酶MKK3/6竞争性结合p38，从而抑制了MKK3/6对p38的磷酸化。我们还检测了LMTK2对TNFα诱导的p38磷酸化作用，发现过表达LMTK2抑制了TNFα诱导的p38磷酸化，而且降低了TNFα诱导的MKK3/6与p38的结合。总之，我们的结果表明，在结肠癌细胞中，LMTK2通过结合p38阻止了MKK3/6与p38的结合，使得p38的磷酸化受到抑制，最终抑制了细胞的迁移侵袭。我们的发现揭示了LMTK2抑制结肠癌细胞转移的作用和分子机制，有助于我们深入认识了解LMTK2在肿瘤发生发展中的作用。
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