摘要
牛磺酸是体内最丰富的游离氨基酸之一，具有抗炎、抗氧化、调节渗透压、参与糖脂代谢等广泛的生物学作用，内源性牛磺酸是蛋氨酸的下游代谢产物，体内牛磺酸能够与胆汁酸作用形成结合型胆汁酸。本试验通过在肉鸡和蛋鸡试验中用牛磺酸替代部分蛋氨酸、添加牛磺酸或胆汁酸的方法，探究牛磺酸对鸡生长发育、产蛋性能、抗氧化性能等方面的影响，并在鸡胚原代肝细胞、肠上皮细胞和成肌细胞中进行了验证，对其中涉及的分子机制进行了初步探究。 试验一以肉鸡为生长发育阶段的研究模型，研究了牛磺酸替代日粮合成蛋氨酸对鸡生长发育的影响。试验挑选256只1日龄体重均匀的肉鸡分为4个组，分别饲喂对照日粮（对照：基础日粮+0.21%（0-3周）/0.14%（4-6周）合成Met,CON），牛磺酸替代对照日粮中15%合成蛋氨酸（15TAU），30%合成蛋氨酸（30TAU）和45%合成蛋氨酸（45TAU）。1-21日龄阶段，15TAU组肉鸡平均日增重最低，但与对照组相比无显著差异（Pgt;0.05）；22-42日龄阶段，各处理组平均日增重和平均日采食量与对照组相比无显著变化（Pgt;0.05）；1-42日龄全程，各日粮处理组平均日增重、平均日采食量和料肉比与对照组相比均无显著差异（Pgt;0.05）；与对照组相比，15TAU组和45TAU组肝脏组织MDA含量下降（Plt;0.05），腿肌组织中，15TAU组的MDA含量下降（Plt;0.05），45TAU组MDA含量呈下降趋势（P=0.07），TAU处理组肝脏组织CAT酶活水平下降（Plt;0.05），腿肌TAU处理组SOD、CAT、GSH-Px等酶活水平下降（Plt;0.05）；糖耐量结果表明，口服葡萄糖（2g/kgBW）前进行腹腔牛磺酸注射（0.2g/kg和0.6g/kgBW），肉鸡血清葡萄糖水平显著低于对照组（Plt;0.05）。以上结果表明，牛磺酸能够部分替代日粮中添加的合成蛋氨酸，参与葡萄糖代谢并改变肉鸡肝脏和腿肌的氧化还原状态。 试验二牛磺酸替代日粮合成蛋氨酸对蛋鸡的影响。将288只40周龄体重、产蛋率相近的伊莎褐壳蛋鸡分为4个组。分别饲喂对照日粮（基础日粮+0.17%合成Met,对照组），牛磺酸替代对照日粮中25%合成蛋氨酸（25TAU）和50%合成蛋氨酸（50TAU），对照日粮中添加0.1%的牛磺酸（0.1%TAU）。结果表明，蛋鸡平均日采食量及平均蛋重未出现明显变化（Pgt;0.05）；50TAU组产蛋率明显高于对照组（Plt;0.05），其余各处理组间无显著差异（Pgt;0.05）；各组间饲料转化效率无显著差异。与对照组相比，50TAU组肝脏组织MDA含量呈下降趋势（P=0.09），50TAU组和0.1%TAU组的SOD酶活水平降低（Plt;0.05），0.1%TAU组Nrf2蛋白表达呈上调趋势（P=0.09）；十二指肠组织中，0.1%TAU组MDA呈下降趋势（P=0.07），50TAU组SOD酶活水平呈下降趋势（P=0.05），0.1%TAU组SOD酶活水平降低（Plt;0.05）；25TAU组十二指肠比重下降（Plt;0.05），50TAU组和0.1%TAU组的十二指肠比重呈下降趋势（P=0.08），50TAU组和0.1%TAU组空肠比重下降（Plt;0.05），50TAU组和0.1%TAU组十二指肠绒毛高度降低（Plt;0.05）。以上结果表明，牛磺酸可能通过Nrf2通路来改变蛋鸡肝脏组织的氧化还原状态，并在一定程度上影响蛋鸡肠道。 试验三牛磺酸胆汁酸处理对肉鸡的影响。试验挑选420只1日龄体重均匀的肉鸡随机分成4个组。分别饲喂对照日粮（基础日粮+0.13%（0-3周）/0.07%（4-6周）合成Met,CON），对照日粮添加60mg/kg胆汁酸（BA-MET），基础日粮添加60mg/kg胆汁酸（未添加蛋氨酸，BA），基础日粮添加60mg/kg胆汁酸，并添加0.13%（0-3周）/0.07%（4-6周）牛磺酸（BA-TAU）。生产性能统计结果显示，1-21日龄阶段，4个组间平均日增重无显著变化（Pgt;0.05）；22-42日龄阶段，与CON组相比BA-MET组平均日增重出现上升趋势（P=0.05），BA组平均日增重显著下降（Plt;0.05）；1-42日龄全程，与CON组相比，BA组肉鸡平均日增重显著降低（Plt;0.05），BA-MET组肉鸡平均日采食量出现上升趋势（P=0.07）。与CON组相比，BA-MET组腹脂比重呈下降趋势（P=0.07），BA组和BA-TAU组腹脂比重明显下降（Plt;0.05）。以上结果表明，胆汁酸能够一定程度促进肉鸡的生长，日粮缺乏蛋氨酸影响肉鸡生产性能，胆汁酸和牛磺酸的联合作用能够弥补日粮蛋氨酸缺乏造成的不良影响。 试验四牛磺酸对鸡胚原代肝细胞、肠上皮细胞抗氧化能力和肝细胞、成肌细胞糖摄取的影响。利用体外培养鸡原代肝细胞、肠上皮细胞和成肌细胞，分别研究了牛磺酸处理（0,1,5,10mM）对肝细胞和肠上皮细胞细胞抗氧化能力及肝细胞和成肌细胞葡萄糖摄取的影响。结果表明：牛磺酸处理组肝细胞的MDA含量、GSH-Px酶活、CAT酶活水平及GSH含量下降（Plt;0.05），SOD酶活水平上升（Plt;0.05），10mM牛磺酸处理组SOD1、SOD2、CAT、GCLCmRNA表达水平上调（Plt;0.05），GSRmRNA表达水平下调（Plt;0.05），Nrf2蛋白表达下降（Plt;0.05）。肠上皮细胞中，SOD酶活水平下降（Plt;0.05），CAT酶活水平上升（Plt;0.05），MDA、GSH含量及GSH-Px酶活水平无显著变化（Pgt;0.05），10mM牛磺酸处理组的Nrf2mRNA表达水平下调（Plt;0.05），其余抗氧化酶基因mRNA表达水平无显著变化（Pgt;0.05）；10mM牛磺酸处理组的Nrf2蛋白表达水平下降（Plt;0.05）。牛磺酸处理组肝细胞和成肌细胞葡萄糖摄取增加（Plt;0.05）。以上结果表明，牛磺酸可能通过Nrf2通路来改变鸡胚原代肝细胞和肠上皮细胞氧化还原状态，并通过影响肝细胞和成肌细胞的葡萄糖摄取参与葡萄糖代谢。 综上结果表明，牛磺酸替代日粮15%、30%、45%合成蛋氨酸对肉鸡生产性能无显著影响，牛磺酸替代日粮25%和50%合成蛋氨酸对蛋鸡生产性能无显著影响，提示牛磺酸可以部分替代日粮合成蛋氨酸；胆汁酸与牛磺酸的联合添加可以缓解日粮蛋氨酸缺乏造成的肉鸡生产性能下降；牛磺酸能够促进肝细胞和成肌细胞对葡萄糖的摄取而调节肉鸡血糖水平，通过Keap1/Nrf2通路改变肉鸡和蛋鸡肝脏的氧化还原状态。
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