摘要
目的： 本课题计划在肝细胞癌（Hepatocellularcarcinoma，HCC）的多系细胞系中对lncRNAHAND2-AS1的表达量进行鉴定，并在此基础上深入探究其在HCC细胞系的侵袭迁移和增殖中发挥的功能。对其在肝癌的始发与发展中的机制展开探讨，从而为HCC的临床治疗带来新的靶标。 方法： 1通过RT-PCR检测lncRNAHAND2-AS1在不同HCC细胞系中的表达情况，正常肝细胞系L02作为对照。 2选取上述检测结果中lncRNAHAND2-AS1表达最低的两种HCC细胞系进行细胞转染。随后分成3组：（1）无任何干预的空白组（blank组）；（2）行空质粒转染的对照组（CON组）；（3）行过表达质粒转染的实验组（HAND2-AS1组）。用RT-PCR检测转染效率。并用细胞划痕、TRANSWELL和MTT实验分别在两种细胞系中分析上述3组细胞系的迁移、侵袭和增殖能力。 3用westernblot实验分别检测上述两种细胞系blank组、CON组以及HAND2-AS1组中PI3K、AKT蛋白的含量。 4用AKT激动剂处理过表达HAND2-AS1的细胞系将其归为AKT组分，在此前提下将PI3K抑制剂LY294002加入其中，将其命名为LY294002组。随后分别在两种细胞系中比较各组细胞系表现出的迁移、侵袭和增殖能力。 结果： 1与L02这一正常肝细胞系对比，lncRNAHAND2-AS1在HCC细胞系HepG2、SMMC-7721、Hep3b、PLC、Huh-7、MHCC-97H、MHCC-97L中的表达明显下降，其中，相较于其他HCC细胞系，lncRNAHAND2-AS1在SMMC-7721和MHCC-97H细胞系中的表达量更低。 2blank组和CON组HCC细胞系的迁移、侵袭和增殖能力无差别。与blank组和CON组相比，HAND2-AS1组HCC细胞系的迁移、侵袭和增殖能力明显下降。 3blank组、CON组HCC细胞系的PI3K和AKT表达差异不显著。而相较于blank组和CON组，PI3K和AKT蛋白在HAND2-AS1组的两种HCC细胞系中的表达明显下降。 4与HAND2-AS1组相比，AKT组细胞系迁移、侵袭和增值能力明显加强，而当加入PI3K抑制剂后，这一增强效果被削弱。 结论： 1LncRNAHAND2-AS1在HCC细胞系中表达量明显降低，通过调节PI3K-AKT信号通路发挥了重要的抑癌作用。 2通过过表达lncRNAHAND2-AS1，可以明显降低HCC细胞系的迁移、侵袭和增殖能力。
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