摘要
黄龙病对柑橘的影响是毁灭性的，至今仍没有比较有效的防治方法。近几年生物菌剂在抗病领域的应用已经有较多的成功报道，如：在棉花、大豆、水稻等作物上的抗病应用中都取得了良好的效果。在前期本实验室工作的基础上，本课题对内生菌在感染了黄龙病的柑橘盆栽苗木上的脱毒效果进行了验证和探究，采用实时荧光定量PCR分子检测、PCR检测以及生理生化和抗性相关的酶进行分析，获得了如下研究结果： 1．利用芽孢杆菌菌株GJ1处理柑橘苗木，在前期研究生的工作基础之上，对GJ1的脱毒效果进行验证。结果表明：GJ1连续处理3次时，对于柑橘黄龙病病原脱毒率达到37.5%，连续处理7次时，对于柑橘黄龙病病原脱毒率达75%。7次处理的脱毒效果与未处理的对照相比，病原携带率百分数差异达到显著水平。 菌株GJ1和菌株GJ3混合菌经过11次菌液浇灌处理后，利用分子检测的方法检测黄龙病病原，结果表明：混合菌处理脱毒效果没有单独使用GJ1的效果明显，仅表现病原相对表达量下降，脱毒率达为37.5%。 利用1号～5号菌剂在盆栽苗木上进行黄龙病控制效果的试验，在进行11次处理后，结果表明，1号和2号菌剂处理有效，脱毒率均达到83.3%；5号菌剂脱毒率为62.5%，3号菌剂脱毒率为60%，4号菌剂脱毒率为50%。 2．利用小分子化合物对感病苗木进行处理，经过9次处理，106、107两种化合物对黄龙病病原的脱毒率分别达到80%、60%，诺氟沙星的脱毒率达到40%，O和Z化合物的脱毒率仅为25%，而苯溴马隆胶囊和J的脱毒率只有20%。 3．对菌剂处理和未处理试验材料的可溶性糖，淀粉和叶绿素含量等生理生化指标进行了分析，结果显示：GJ1菌剂、GJ1+GJ3菌剂混合处理及1号～5号菌剂处理的样品中可溶性糖含量与对照相比，均有显著差异。GJ1处理的样品叶片、根部淀粉含量均显著低与对照中的淀粉含量；1号～5号菌剂处理的叶片中的淀粉含量均显著低于对照样品的淀粉含量。叶绿素含量变化：GJ1处理的样品中叶绿素含量变化与对照差异不显著，1号、3号处理植株的叶绿素含量与对照有显著差异。 4．本试验还对菌剂处理和未处理试验材料的抗病相关的多酚氧化酶（Polyphenol oxidase,PPO）、过氧化物酶（Peroxidase,POD）、苯丙氨酸解氨酶（Phenylalaninammo-nialyase,PAL）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、硫氧还蛋白还原酶（Thioredoxin reductase,TrxR）5种酶的活性进行了分析。结果显示，PPO酶活性变化，以GJ1、1号、3号菌剂处理的PPO酶活性与对照相比差异显著；POD酶活性变化，以GJ1、1号、2号和3号处理的POD酶活性显著高于对照样品的POD酶活；PAL酶活性变化，以GJ1、1号、3号等菌剂处理的酶活性与对照的PAL酶差异显著；SOD酶活性变化，以GJ1、1号～4号菌剂样品的酶活显著高于对照；TrxR酶活性变化，GJ1处理的、1号、3号处理的TrxR酶活性与对照差异显著。
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