摘要
稻谷是我国南方居民主食之一，对其品质影响最大的是霉菌污染，霉菌的生长造成稻谷霉变，使其失去食用价值。黑曲霉（Aspergillusniger）是储藏稻谷中的优势霉菌之一，它们因强致霉变能力以及真菌毒素产生潜力而对稻谷安全造成严重威胁。已有的研究显示，黑曲霉属于黑曲霉群（Aspergillus niger aggregate）的27个种之一，黑曲霉群是从形态学上难以区分的菌种，其中一部分能产生赭曲霉毒素A（Ochratoxin A,OTA）。因此对稻谷中黑曲霉群进行准确分类，明确其产毒潜力及生物学特性显得尤为重要。到目前为止，国内还没有对稻谷中黑曲霉群的系统研究，因此本文以我国南方十省具有代表性的仓储稻谷为对象，对其中的黑曲霉群进行分离鉴定，测定其产OTA能力及不同碳源条件下生长情况与氧化耐受能力的差别。本文主要结果如下： 1.通过ITS和CaM序列测序，共从我国南方稻谷主产区代表性粮库中鉴定出107株黑曲霉群，它们分别被分为黑曲霉、百岁兰曲霉（Aspergillus welwitschiae）、塔宾曲霉（Aspergillus tubingensis）和新黑曲霉（Aspergillus neoniger）四个种。系统发育分析将这四个种分为两大分支，黑曲霉和百岁兰曲霉属于同一分支，塔宾曲霉和新黑曲霉属于另一分支，不同地区间同种的亲缘关系接近。黑曲霉和百岁兰曲霉的流行率随纬度的降低而升高。 2.对107株黑曲霉群进行OTA检测，结果显示所有菌株均为不产OTA株。其中酶联免疫法（ELISA）初筛结果显示其中7株为阳性菌株，但通过超高效液相色谱法（HPLC-FLD）以及OTA生物合成簇鉴定的方法复筛却发现，这107株黑曲霉群菌株均为不产OTA株。 3.对不同碳源条件下培养的黑曲霉HY2的生长及氧化耐受能力进行研究，结果显示，当H2O2浓度为20mM时，仅有以蔗糖、葡萄糖和纤维素为碳源的菌株缓慢生长。当H2O2浓度为10mM时，以木糖为碳源的菌株产孢量最高，达到1.22×107个/mL，且其胞内抗超氧阴离子、SOD和GPX活力也较强；以阿拉伯糖为碳源的菌株胞内H2O2和MDA含量较低，SOD和CAT活力较强，说明这两种碳源下培养的菌株氧化耐受能力更强。而以麦芽糖为碳源的菌株产孢量最低，仅为3.52×106个/mL，其抗超氧阴离子和CAT活力也较低，说明以麦芽糖为碳源的菌株氧化耐受能力较弱。
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