摘要
阻塞性睡眠呼吸暂停（obstructivesleepapnea,OSA）是一种常见的睡眠障碍疾病，表现为夜间打鼾，睡眠片段化，日间嗜睡、乏力以及认知功能障碍，是心脑血管疾病的独立危险因素。主要病理特征是睡眠期间反复的上呼吸道痿陷导致的慢性间歇性低氧（chronicintermittenthypoxia,CIH）。OSA患者认知功能障碍主要表现在注意力、记忆力缺陷和执行决策能力紊乱，CIH暴露引起的海马突触可塑性下降是认知障碍发生的关键病理机制。谷氨酸受体信号通路对学习和记忆形成过程起到重要的作用，海马神经元的凋亡是CIH-认知障碍的主要原因。本研究分为两部分，首先明确沙参麦冬汤干预对CIH诱导认知障碍的神经保护作用机制，进一步探讨沙参麦冬汤干预对CIH诱导海马神经元内质网应激-凋亡的改善作用机制。 第一部分沙参麦冬汤通过调节NR2B-ERK通路改善慢性间歇性低氧诱导的认知障碍 目的：探究沙参麦冬汤干预对CIH小鼠模型认知障碍的改善作用，明确相关的神经保护机制。 方法：48只雄性C57BL/6小鼠随机平均分为4组（n=12每组）：Normoxia组、CIH组、Formula+CIH组、Formula组。各组于每天9:00am-5:00pm上舱，向CIH组、Formula+CIH组舱内充入100%氮气和医用氧（＞99.5%），使舱内氧浓度在9-21%之间循环，每循环3min。向Normoxia组、Formula组充入空气对照，共35天。Formula+CIH组、Formula组上舱前灌胃给予沙参麦冬汤（含生药：3.645g/kg），而Normoxia组和CIH组灌服同等体积纯水。在上舱25-35天同时进行行为学实验，CIH暴露第35天断头取脑，分离海马，部分用多聚甲醛和电镜固定液固定形态，用于尼氏染色、高尔基染色和透射电镜观察。另一部分冻存于-80℃，用于Westernblot检测蛋白表达情况。 结果：沙参麦冬汤干预显著提高了CIH小鼠的行为学成绩，改善了CIH诱导的小鼠海马突触可塑性的下降，抑制了CIH诱导的NR2B/CAMKⅡ/SynGAP的活化，增加了ERK/CREB的磷酸化，上调了PSD-95和BDNF表达水平。 结论：沙参麦冬汤通过调节NR2B-ERK信号通路减轻了CIH诱导的认知功能障碍。 第二部分沙参麦冬汤通过抑制内质网应激改善慢性间歇性低氧诱导海马的神经元凋亡 目的：探讨沙参麦冬汤干预是否对CIH小鼠神经元损伤具有保护作用；探讨沙参麦冬汤干预对CIH小鼠神经元内质网应激-凋亡的保护作用机制。 方法：实验分组、造模方法同第一部分。造模结束后分离海马组织，应用Tunel染色观测神经元凋亡，应用尼氏染色和电镜观察神经元损伤，通过westernblot评估Bcl-2，Bax，Caspase-12，CHOP以及GRP-78，ATF6，Perk，IRE1的表达水平。 结果：沙参麦冬汤干预明显改善了CIH诱导的海马神经元凋亡，减轻了神经元线粒体损伤；沙参麦冬汤可显著上调Bcl-2/Bax比值，降低Caspase-12，CHOP表达，抑制GRP78，ATF6表达，降低PERK，IRE1磷酸化水平。 结论：沙参麦冬汤可通过抑制内质网应激改善慢性间歇性低氧诱导的海马神经元凋亡。
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