摘要
糖尿病一旦发病便是终生的、难以完全治愈，同时长期高血糖会引发一系列慢性或急性并发症，因而严重危害患者的生命健康。目前虽有多种降糖药物可以用于临床治疗，但大部分药物会对人体产生明显的毒副作用，且易出现耐受性，不利于长期使用。低毒性的天然药物在治疗糖尿病过程中发挥了独特的优势，其药效是多种成分、多种机制协同增效的综合表现，不易出现耐受性，并且对糖尿病引发的综合征也有较好的治疗作用，因此从天然药物中寻找抗糖尿病药物已引起广泛关注。 青钱柳和多穗柯嫩叶在民间作为甜茶饮用，已有数百年历史，研究表明，这两种甜茶都具有较好的降糖作用。本文对两种不同种属甜茶活性成分提取、成分分析、毒性、生物活性等进行了系统的研究。研究表明蒸馏水和60%乙醇分别是提取青钱柳与多穗柯活性成分的最佳溶剂，提取率分别达到26.1%、24.4%；通过UPLC-MS法，基于高分辨分子量和质谱碎片信息，结合数据库比对，对两种甜茶叶提取物的主要成分进行了剖析，从青钱柳水提物中分析出313个化合物，确定了其中46个化合物的结构，而从多穗柯醇提物中分析出219个化合物，确定了其中49个化合物的结构。 采用UF-UPLC-MS法对多穗柯醇提物中潜在α-葡萄糖苷酶抑制剂进行高通量筛选，有18个化合物对α-葡萄糖苷酶有显著的抑制作用，其中11个化合物活性相当或优于阳性对照，值得一提的是，柚皮素（IC50=10.03±3.01μg/mL）、落新妇苷（IC50=6.14±1.21μg/mL）、桑色素（IC50=8.46±2.16μg/mL）具有优良的α-葡萄糖苷酶抑制活性，为首次从多穗柯中发现的黄酮类α-葡萄糖苷酶抑制剂，动力学研究表明它们均为α-葡萄糖苷酶的可逆抑制剂。通过计算机模拟对抑制剂与α-葡萄糖苷酶的结合模式进行了理论预测，结果表明活性越强的化合物与酶的结合越牢固，为活性测定的结果提供了合理的解释。此外，复配物的α-葡萄糖苷酶抑制作用明显优于单个提取物，揭示了提取物中各种α-葡萄糖苷酶抑制剂之间存在着协同增效作用。 青钱柳水提物和多穗柯醇提物对哺乳动物细胞未表现出毒性，为人体服用的安全性提供了重要参考。小鼠体内降糖活性研究表明，青钱柳和多穗柯提取物复方的降糖效果明显高于单方，特别是配比为青钱柳∶多穗柯=2∶1的高剂量组【1.2g/(kg·d)】不仅具有优良的降糖效果，而且脏器病理切片还显示其对小鼠器官功能具有良好的恢复作用，明显优于阳性，各种指标水平接近正常组。值得指出的是，它还对糖尿病引发的雄性生殖系统损伤具有良好的修复效果。以最佳配比的青钱柳和多穗柯提取物作为主料，添加辅料制成青钱柳与多穗柯复方降糖片，体内活性研究证明该制剂具有良好的降糖作用和安全性。
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