摘要
背景 抑郁症是一种基因与环境交互影响的重大精神疾病。以显著而持久的心境低落与兴趣减少为主要临床特征，因其发病率、复发率及自杀风险极高，对人们身心健康和社会经济带来严重负担。随着生活节奏的加快和竞争压力的增加，使得抑郁症的发病率逐年增加。世界卫生组织（WHO）报道，全球有超过3.2亿人罹患抑郁症，截止2017年，中国有超过5400万抑郁症患者。在中国，抑郁症已经成为仅次于心脏病的第二大疾患，约7个成年人中就有1个抑郁症患者。因此，抑郁症的发病机理研究与抗抑郁药研发迫在眉睫。 抑郁症是一种多病因、异质性大的精神疾病。其发病机制不清且复杂，并且伴随大量分子及通路的异常改变。应激是诱发抑郁症发病的重要因素，而慢性和长期的应激事件会导致长期的心理压力。慢性不可预知温和刺激抑郁模型的机理与人类抑郁症发病机理更为接近，其久而稳定且具有高度有效性，是理想可靠的抑郁动物模型，也是抑郁症相关研究中最常用的抑郁动物模型。 近年来，多组学的方法广泛应用于多种疾病的分子机制研究，它不仅对疾病机理研究、确定致病靶点起到推动作用，也为疾病基础科学和精准医学研究提供了新的思路。因此，多组学整合分析已成为探索抑郁发病机制的新方向，其中蛋白-代谢组学整合分析是最有效和常用的方式之一。 本研究以杏仁核这一参与情绪调节和应激反应的关键脑区为研究靶点，并进一步聚焦慢性不可预知温和刺激（CUMS）模型，运用蛋白-代谢组学整合分析的方法探索抑郁症发病的分子机制，为临床治疗抑郁症寻求新的药物靶点提供理论依据。 目的 以CUMS这一经典抑郁模型为研究对象，探索杏仁核中蛋白和代谢差异物的改变，并对蛋白质组学和代谢组学数据进行整合分析，为抑郁症发病机制和新药靶点的研究提供理论依据。 方法 1.构建CUMS模型及其相应的对照组，通过糖水偏好试验筛选应激敏感大鼠。造模结束后采用糖水偏好试验、强迫游泳试验、旷场试验、高架十字迷宫试验测量大鼠的抑郁和焦虑样行为。 2.采用液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）技术检测CUMS模型及其相应对照组杏仁核的代谢物谱，筛选差异代谢分子。采用MetaboAnalyst进行CUMS模型差异代谢物的通路富集分析。 3.采用同位素相对标记与绝对定量（iTRAQ）蛋白质组学技术检测CUMS模型及对照组杏仁核的蛋白质谱，筛选差异蛋白质。此后运用IngenuityPathwayAnalysis（IPA）对CUMS模型差异代谢物和差异蛋白进行整合分析。 结果 1.造模结束后，与对照组相比，CUMS造模大鼠体重增长显著减慢；测试抑郁样行为的行为学均有显著差异，体现在糖水偏好显著降低、强迫游泳静止时间显著增加；测试焦虑样行为的行为学均无显著差异，体现在旷场试验中运动总距离和站立次数无显著差异，高架十字迷宫试验中开臂进入次数与停留时间无显著差异。 2.蛋白质组学结果中，与对照组相比，CUMS大鼠发现171种差异蛋白，其中112个蛋白含量上升，59个蛋白含量下降；代谢组学结果中，与对照组相比，CUMS大鼠发现42种差异代谢物，其中11个代谢物含量上升，31个代谢物含量下降。 3.蛋白-代谢整合分析发现：（1）CUMS大鼠氨基酸，碳水化合物代谢及其与运输/分解代谢有关的蛋白质和代谢酶功能异常;（2）突触形成和氧化磷酸化相关蛋白的表达异常。 结论 我们基于iTRAQ的蛋白质组学和LC-MS/MS的代谢组学结果，对CUMS大鼠杏仁核中发生的分子变化有了一定的了解。我们发现在大鼠CUMS模型中，代谢组学和蛋白质组学之间存在一些一致的变化，具体包括氨基酸代谢失调，葡萄糖代谢，突触信号转导和氧化磷酸化相关蛋白表达异常。这些发现为抑郁症的发病机制研究提供了理论依据，并有助于寻找抗抑郁药的潜在靶标。
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