摘要
天冬[Asparaguscochinchinensis(Lour.)Merr]作为我国传统的中药材，具有养阴润燥、清肺降火、抗氧化、抑菌消炎、抗肿瘤等功效，集药用、食用、饲用与观赏于一身，有巨大的开发潜力。目前天冬繁殖以种子繁殖、分株繁殖为主，但因为周期长、繁殖系数低而限制其种苗生产。尽管部分研究者对天冬组培快繁进行过探索，但仍未建立起有效的快繁技术体系。本研究系统探索了天冬种子无菌萌发与外植体培养、愈伤组织诱导与不定芽形成、丛生芽诱导与增殖、试管苗生根与移栽等环节的适宜条件，为有效构建该物种规模化人工种植所需的种苗快繁技术提供了依据。主要结果如下： 1、种子灭菌与萌发培养条件：以成熟饱满的天冬种子的培养材料，进行消毒处理，适宜的消毒方法为：75%乙醇处理30s，2%的次氯酸钠处理20min或0.1%升汞处理10min；适宜的种子萌发培养基为：MS+KT0.1mg·L-1+GA30.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1，pH5.8~6.0，培养15d时，种子开始露白，培养36d左右芽苗生长到3cm以上，生长良好；三种植物生长调节剂对天冬种子萌发作用大小排序为GA3gt;KTgt;6-BA，经方差分析GA3的作用达到显著水平。 2、愈伤组织诱导与不定芽形成条件：以节间为外植体，进行愈伤组织诱导与不定芽的诱导，愈伤组织诱导培养基为：1/2MS+NAA1.0mg·L-1+6-BA0.1mg·L-1蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1，pH5.8~6.0；外植体9d时出现愈伤，21d时茎段布满愈伤组织，影响作用大小为：NAA?6-BA?培养基中大量元素含量，经方差分析NAA对愈伤的影响作用达到显著水平（Plt;0.05）。分化培养基为：MS+NAA0.3mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1+KT0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1，pH5.8~6.0，分化率达98.56%；三种生长调节剂对愈伤组织分化的影响作用大小为：6-BA?KT?NAA，其中6-BA、KT对愈伤组织分化的影响达到显著水平（Plt;0.05），是天冬愈伤组织分化的重要因素。增殖培养基为：NAA0.3mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1+KT0.5mg·L-1+KH2PO430mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1，pH5.8~6.0，增殖倍数达6.64。 3、带芽茎段诱导丛生芽及其增殖条件：以带芽茎段为外植体，进行丛生芽诱导与增殖，腋芽诱导培养基为：MS+NAA0.1mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1+蔗糖30mg·L-1+琼脂7mg·L-1，pH5.8~6.0。诱导率达85.05%，平均芽数最高达2.87个，芽颜色翠绿，生长健壮；丛生芽增殖培养基为：MS+6-BA0.5mg·L-1+IAA1.5mg·L-1+KT1.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1，pH5.8~6.0，培养21d后，其增殖倍数达3.65，三种生长调节剂的影响作用大小为：KTgt;6-BAgt;IAA，经方差分析KT的作用达到显著水平（Plt;0.05）。添加100g·L-1的香蕉泥，增殖倍数达到4.47，优于苹果泥、椰汁、土豆泥。当增殖过程中出现褐化现象时，添加PVP1.0g·L-1可降低褐化率至14.13%。 4、生根培养条件：以无根芽苗为外植体，进行生根培养。在1/2MS中生根率达到最高为78.59%，与White、MS、1/4MS培养基中芽苗生根率有显著差异（Plt;0.05）；适宜的生根培养基为：1/2MS+IAA1.0mg·L-1+IBA1.5mg·L-1+PUT1.0mg·L-1蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1，pH5.8~6.0，生根率78.89%，三种植物生长调节剂对生根诱导的影响作用大小为：IBA?PUT?IAA，均对天冬生根的影响达到显著水平（Plt;0.05）；同时添加0.5g·L-1活性炭有利于根系变粗，茎枝繁茂。 5、适宜的移栽基质：以椰糠、泥炭、蛭石、珍珠岩、园土为基质原料进行混合组配后分别植入天冬试管苗，通过对各组合基质理化性质分析、试管苗生长状况观察和生理指标测定，基质容重与试管苗移栽成活率呈极显著负相关（Plt;0.01），基质孔隙度与试管苗生长指标呈正相关。在椰糠-珍珠岩-蛭石（容重为0.23g·cm-3、总孔隙度为65.07%、pH为6.30、电导率为0.51mS·cm-1）组合基质中，试管苗成活率达87.10%，生长健壮，优于其它基质；隶属函数综合评价得出椰糠︰珍珠岩︰蛭石=1︰1︰1的组合基质评分最高（0.93），更有利于试管苗生长，为试管苗的适宜栽培基质。
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