摘要
AM真菌能与地球上80%以上的陆生维管植物形成互惠共生体，可促进植物吸收土壤矿质营养，提高植物抗逆性、抗病性，改善土壤结构，修复土壤重金属污染等，既可作天然菌肥，又可作生防制剂，在农（林）业生产中，有着巨大的应用前景。但AM真菌专性共生的特性，使其必须与宿主植物根系共生才能生长和完成生活史，这使得AM真菌菌剂规模化生产受到极大限制。以毛状根为宿主，接种AM真菌孢子，建立毛状根-AM真菌双重培养体系，是目前解决AM真菌纯培养和菌剂规模化生产的有效途径。 本试验以发根农杆菌C58C1诱导4种烟草和颠茄共5种植物叶片产生毛状根，将毛状根与从土壤中分离鉴定的隔球囊霉属（Septoglomus）孢子建立双重培养体系，筛选出适合Septoglomus孢子的消毒方法和培养温度，成功建立了3种烟草毛状根与Septoglomus双重培养体系，并筛选出Septoglomus的最适宿主毛状根。具体试验结果如下： 1.C58C1侵染NC82、Va116、K87、K3264种烟草和颠茄叶片，经形态水平和组织水平鉴定确定均为毛状根。不同植物甚至是同种植物不同基因型毛状根诱导率不同，诱导率K87（92.86%）＞K326（89.61%）＞NC82（87.34%）＞颠茄（78.46%）＞Va116（38.64%），且5种植物叶片生根快慢和毛状根构型不同。经固体和液体培养基优化培养得出结论：适当降低蔗糖浓度更有利于毛状根的生长。 2.从土壤中分离，经形态鉴定，得到Se.constrictum和Se.furcatum孢子，其中Se.furcatum是中国新记录种。探究发现75%酒精能有效降低污染率，结合传统消毒方法，短时（0.5~1min）75%酒精和低温处理更利于孢子萌发。萌发率最高（48.06%）的处理为：75%酒精消毒30s，A液、B液各处理6min，4℃处理一周再转入25℃。孢子萌发时，从连孢菌丝处继续生长出菌丝，在离孢子不远处菌丝会产生大量分支，极易在孢子附近形成菌丝簇。 3.不同植物品种和同种植物不同基因型植物毛状根与孢子共生情况都不同。染色确认烟草NC82、Va116、K87毛状根与Septoglomus建立双重培养体系，未产孢，Va116和颠茄未共生。其中NC82毛状根是最适宿主。在孢子发育过程中，发现在未共生时菌丝末端有膨大现象，类似于其他种属AM真菌产孢；在菌丝生长过程中，观察到特异性结构，如愈合、环状菌丝、三角交叉菌丝等。 本试验建立了稳定的5种毛状根诱导体系，获得了大量生长稳定的毛状根，这为之后的研究提供了良好的宿主材料；首次研究Septoglomus孢子消毒方法和萌发温度；首次以颠茄毛状根作为宿主建立双重培养体系，但是未成功；成功建立了烟草NC82、K87、Va1163种毛状根与Septoglomus双重培养，但未产孢。记录了孢子发育和菌丝生长过程，确定了烟草NC82毛状根为Septoglomus最适宿主。
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