摘要
背景乳腺癌是世界第二大癌症致死因素，复发和转移是主要致死原因。其中三阴乳腺癌（TNBC）亚型具有更高度的肿瘤内异质性和侵袭转移能力[1]，突变率比乳腺癌其他亚型大约高出7-13倍[2]；高的突变率使TNBC拥有更高的免疫原性以及更多的肿瘤内免疫浸润。目前驱动TNBC发病的分子机制尚未完全阐明。信号转导子和转录激活子-1（STAT1），在机体中响应细胞因子和生长因子的信号，维持正常免疫调节功能。已经发现在多种恶性肿瘤中STAT1被异常激活，如乳腺癌和膀胱癌中STAT1的表达明显高于其相邻的正常组织[3]，但具体预后价值仍存在争议。2-NP又称为2-（1,8-萘啶-2-基）苯酚，可以通过STAT1Tyr701（酪氨酸）位点的磷酸化来特异性增强STAT1依赖性基因的表达。本课题基于STAT1的活性状态，探究STAT1在肿瘤中的生物学功能。目的1.观察人乳腺癌组织标本中STAT1及其活性状态（pSTAT1）的表达情况；2.通过生物信息学分析STAT1在乳腺癌中参与的生物学功能和过程；3.研究人乳腺癌细胞系中pSTAT1的生物学功能；4.分析pSTAT1与免疫检查点PD-L1在乳腺癌中的相关性，探究STAT1在肿瘤免疫中的功能。方法1.采用免疫组化技术，检测乳腺癌以及乳腺良性病变组织中STAT1/pSTAT1蛋白表达情况。2.利用癌症基因组图谱（TCGA）数据库中1222例乳腺癌患者的转录组数据和临床数据对STAT1进行生物信息学分析。3.使用WesternBlot以及流式细胞术，从蛋白质以及细胞水平对乳腺癌细胞系进行检测分析；通过CCK8和细胞损伤划痕迁移实验测定STAT1活性状态下细胞的增殖和迁移能力。4.通过免疫组化和qRT-PCR实验分析PD-L1与pSTAT1在乳腺癌中的相关性。结果1.STAT1与pSTAT1在乳腺癌中高表达，主要集中在三阴乳腺癌中。2.生物信息学分析STAT1可以调节免疫、抑制肿瘤、抑制细胞生长以及促进细胞凋亡，与乳腺癌的肿瘤分期和肿瘤大小及浸润深度相关。3.pSTAT1抑制乳腺癌细胞增殖，促进迁移，对凋亡无影响。4.PD-L1在TNBC中高表达，上调乳腺癌中pSTAT1促进PD-L1的表达，在TNBC中PD-L1的高表达可能与STAT1-IRF1-PDL1通路上调有关。结论pSTAT1在乳腺癌中高表达，抑制细胞增殖、促进迁移，并诱导PD-L1的表达。推测乳腺癌中pSTAT1高表达可以保护肿瘤细胞免受免疫的攻击，并维持低应答高抵抗力状态，保留其迁移能力，从而在适宜条件下发生转移。
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