摘要
胚胎着床是妊娠过程起始的关键阶段，一旦着床过程出现异常，将会对妊娠结局造成严重的不良影响。载脂蛋白E（ApolipoproteinE，ApoE）属于载脂蛋白家族的一员，是一种多功能分泌蛋白。ApoE主要在大脑和肝脏合成，经循环系统运输至全身各个器官，参与细胞对脂蛋白的摄取，是胆固醇转运和代谢的关键调节分子，在脂类代谢过程中发挥重要作用。除肝脏和大脑外，巨噬细胞、脂肪细胞等也能分泌ApoE，可以在组织中发挥调节炎症反应等作用。在着床窗口期，人子宫内膜中APOE的表达显著上调，此外，一些类固醇激素如雌激素和孕酮的合成也需要ApoE提供胆固醇前体。虽然种种研究均表明ApoE在女性生殖中扮演重要角色，但ApoE在早期妊娠中的功能还不清楚。在本研究中，我们将探索巨噬细胞来源的ApoE在胚胎着床过程中发挥的作用。 原位杂交结果显示，Apoe主要在妊娠第3~4天小鼠子宫腔上皮下基质区域表达，第5~8天逐渐扩散至子宫内膜最外层区域。为了探明子宫中ApoE的来源，我们设计了免疫双荧光实验，结果显示ApoE与血管内皮标志分子CD31无共定位现象，而与巨噬细胞标志分子F4/80存在共定位，因此我们我们推断子宫中的ApoE不是经循环系统运输而是由巨噬细胞分泌。为了研究ApoE作用的靶细胞，我们分别分离培养了第3天小鼠子宫原代基质细胞和上皮细胞，并用不同浓度的COG133（ApoE类似物）处理24h，实验结果显示COG133处理可以显著上调上皮细胞中接受态相关基因Stat3、Lif、Ihh、HbegfmRNA水平的表达，而同等浓度COG133处理后的基质细胞中接受态相关基因Stat3、Pgr、EsrmRNA水平无显著变化。随后我们对人子宫内膜癌细胞系进行相同处理，结果表明STAT3、LIF、HBEGFmRNA水平显著上调，MUC1mRNA水平显著下调。说明在体外培养模型中COG133可以调节上皮细胞接受性相关分子的表达。为了探究巨噬细胞来源的ApoE是否可以调节相关分子的表达，我们分别培养了ApoE敲除小鼠和野生型小鼠的腹腔巨噬细胞，并与第3天小鼠子宫原代上皮细胞共培养24h，通过免疫荧光检测蛋白表达情况。实验结果表明与敲除小鼠巨噬细胞共培养的上皮细胞中Stat3、p-Stat3、Msx1蛋白表达水平均发生了下调。 我们的研究结果表明，子宫中的ApoE由巨噬细胞分泌，并且通过作用于上皮细胞参与调节子宫的接受性。
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