摘要
木麻黄青枯病是由劳尔氏菌（Ralstoniasolanacearum）侵染引起的一种毁灭性的维管束病害，如何防控木麻黄青枯病是目前亟需解决的重大问题之一。本论文在前期研究的基础上，对木麻黄根际真菌PaecilomycesformosusCesf-11和HumicolafuscoatraCesf-14的次生代谢产物及其生物活性进行研究，其研究结果如下： （1）采用形态学和多基因分子系统学相结合的方法，将根际真菌Cesf-11鉴定为台湾拟青霉（Paecilomycesformosus）。通过大米培养基进行大规模发酵培养，而后采用乙酸乙酯冷浸提取，进一步采用石油醚和二氯甲烷萃取，分别得到石油醚粗提物51.8g，二氯甲烷粗提物64.0g。采用TLC-MTT-生物自显影法测定粗提物的抗细菌活性，结果表明石油醚和二氯甲烷粗提物对青枯病菌均表现出较强的抑菌活性，其抑菌斑直径均大于10mm，Rf值表明其活性成分大多为中等偏大极性化合物。采用多孔板-DPPH法测定粗提物的抗氧化活性，其中二氯甲烷粗提物表现出最好的抗氧化活性，IC50值为0.71mg/mL，石油醚提取物的IC50值为1.95mg/mL。 （2）采用同样的方法，将根际真菌Cesf-14鉴定为棕黑腐质霉（Humicolafuscoatra）。通过大米培养基发酵和乙酸乙酯冷浸提取，进一步采用石油醚和甲醇萃取得到石油醚粗提物85.5g，甲醇粗提物66.1g。抗菌活性结果表明石油醚和甲醇粗提物对青枯病菌均表现出较强的抗菌活性，其抑菌斑直径均大于10mm，Rf值表明活性成分大多为中等偏小极性化合物。抗氧化活性结果表明甲醇粗提物表现出最好的抗氧化活性，IC50值为0.15mg/mL，石油醚提取物的IC50值为2.82mg/mL。 （3）通过各种色谱学和波谱学方法，从根际真菌Cesf-11中共分离并鉴定6个单体化合物，分别为2-(4-羟苯基)乙酸乙酯（Cesf-11-A）、6-羟基-8-甲氧基-3-甲基异香豆素（Cesf-11-B）、2-(4-Hydroxyphenethoxy)propanoicacid（Cesf-11-E）、4-(1-Hydroxyethyl)-5-phenyl-1,3-dioxol-2-one（Cesf-11-F）、p-Hydroxybenzoylforrnicacid（Cesf-11-G）和MicrosporolC（Cesf-11-H），其中化合物Cesf-11-E和Cesf-11-F为新化合物，其余均为已知化合物。从根际真菌Cesf-14中共分离并鉴定8个已知的单体化合物，分别为对羟基苯甲醛（Cesf-14-A）、苜蓿素（Cesf-14-C）、原儿茶酸（Cesf-14-D）、对羟基苯甲酸（Cesf-14-E）、反式阿魏酸（Cesf-14-F）、2-(4-羟苯基)乙酸乙酯（Cesf-14-G）、酪醇（Cesf-14-K）和苯乙酸（Cesf-14-L）。 （4）采用多孔板-MTT法测定化合物的抗细菌活性，结果表明所有单体化合物对青枯病菌的MIC值均大于256μg/mL。采用多孔板-DPPH法测定化合物的抗氧化活性，结果表明原儿茶酸（Cesf-14-D）的抗氧化活性最强，IC50值为6.89μg/mL；其次为反式阿魏酸（Cesf-14-F），IC50值为29.51μg/mL；Cesf-11-F也表现出一定的抗氧化活性，IC50值为136.40μg/mL。其他单体化合物的IC50值均大于256μg/mL。 本论文的研究为根际真菌资源的综合开发和利用提供了重要的理论依据。
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