摘要
抗菌肽（Cathelicidin）是一类存在于哺乳动物体内的活性多肽，其成员AntibacterialpeptideLL-37/CathelicidinRelatedAntimicrobialPeptide(LL-37/CRAMP)是一种人、鼠共有的抗菌肽，人源称为LL-37，鼠源称为CRAMP。其作用机制复杂，在炎症、自身免疫性疾病以及肿瘤等疾病中参与疾病的调控。炎症性肠病(Inflammatoryboweldisease,IBD)是一种可累及回肠、直肠和结肠的肠道炎症性疾病并具有复杂的发病机制，肠道稳态的失调会引发慢性炎症，持续的组织炎症会导致组织修复障碍进而导致结直肠癌（Colorectalcancer,CRC）的发生。IBD引发的结直肠癌称为结肠炎相关性结肠癌（ColitisAssociatedCancer,CAC）。近年来有研究指出CRAMP炎症反应密切相关，但是CRAMP不仅具有抗炎作用，在特定条件下也会增加促炎因子表达，具有选择性调控炎症反应的作用。因此，本研究将通过分别建立急性、慢性IBD以及CAC动物模型，初步探讨CRAMP在炎性肠病及CAC发生发展中的作用。 本研究首先通过文献分析了解CRAMP和炎性肠病研究前沿及热点，并分别通过急、慢性IBD和CAC动物模型探究CRAMP在不同炎症条件下的作用：（1）急性IBD小鼠模型的构建：用含3%葡聚糖硫酸钠（Dextransulfatesodium,DSS）饮水7天的方法诱导急性IBD小鼠模型，其中干预组在4-7天通过腹腔注射给予4mg/kg/天的重组CRAMP蛋白，实验期间每天对小鼠体重和腹泻情况进行观察并记录，实验结束记录肠道长度和重量，观察肠道组织病理变化，检测白介素-6（Interleukin-6,IL-6）、单核细胞趋化蛋白（MonocyteChemoattractantProtein,MCP-1）和肿瘤坏死因子α（TumorNecrosisFactor,TNF-α）在外周血和结肠组织中的含量以及结肠组织中的mRNA水平。（2）慢性IBD小鼠模型的构建：用3%DSS饮水5天后，正常饮水14天，以此为一个循环，共重复三个循环建立慢性IBD小鼠模型，其中干预组在第三个循环时通过腹腔注射给予3mg/kg/天的CRAMP重组蛋白，实验期间对体重和腹泻情况进行观察并记录，实验结束记录肠道长度和重量，观察肠道组织病理变化，检测IL-6、MCP-1和TNF-α在外周血和结肠组织中的含量以及结肠组织中的mRNA水平。（3）AOM/DSS诱导小鼠结肠炎相关性结肠癌模型：腹腔注射AOM1天后，处理方法同慢性IBD小鼠模型，实验期间对体重和腹泻情况进行观察并记录，实验结束观察结肠肿瘤情况及肠道组织病理变化。 本研究发现：（1）通过文献分析，我们发现近20年来国内研究人员对CRAMP的关注度逐年上升，但并未出现较活跃的科研团队。炎性肠病的研究人员在小范围内集中，研究内容以肠镜、粪菌移植等诊断或治疗方法居多。（2）在急性IBD模型中，CRAMP干预后显著减缓DSS诱导的体重降低和结肠长度缩短；CRAMP干预后结肠组织炎症指数显著降低，炎症程度、炎性细胞浸润程度和组织学损伤显著降低，显著延长绒毛长度和隐窝深度；CRAMP干预后外周血中IL-6的含量显著降低，结肠组织体外培养上清中IL-6、MCP-1和TNF-α的含量显著降低，结肠组织中IL-6、MCP-1和TNF-αmRNA水平显著降低。（3）在慢性IBD模型中CRAMP干预后虽然诱导体重显著降低，但是显著增长了小肠长度；CRAMP干预后回肠炎症指数显著降低，结肠和回肠组织炎症程度、炎性细胞浸润程度和组织学损伤程度显著降低；CRAMP干预后外周血中IL-6、MCP-1和TNF-α的含量显著降低，结肠组织体外培养上清中IL-6和TNF-α含量显著降低，结肠组织中IL-6、MCP-1和TNF-α的mRNA水平显著降低。（4）CAC干预组与肠癌组相比，体重未见明显变化，癌症病理评分未见明显变化。 因此，我们研究发现在急性和慢性IBD小鼠模型中，CRAMP具有显著的保护作用，但是在CAC小鼠模型中，CRAMP对肿瘤的发生发展并没有显著的影响。这将为CRAMP的临床合理应用提供重要的指导意义。
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