摘要
目的骨转移是非小细胞肺癌(Non-SmallCellLungCancer，NSCLC)常见的转移部位，目前针对NSCLC骨转移的检测依赖于影像学，缺乏液体活检手段；此外，随着抗肿瘤药物的不断发展，靶向治疗和免疫治疗大大改善了晚期NSCLC患者的生存状况，MET通路能够促进骨转移的发生发展，同时骨转移还具有特殊的免疫微环境，针对MET通路的靶向抑制剂和免疫检查点抑制剂药物可及。综上，本课题欲探索：第一：血浆外泌体microRNA作为NSCLC骨转移生物标志物的价值；第二，骨转移患者中，MET靶向抑制剂疗效预测生物标志物是什么；第三，MET蛋白表达程度能否预测NSCLC骨转移患者接受免疫检查点抑制剂的疗效。 方法本研究包含三部分，第一部分收集了16例驱动基因阴性晚期NSCLC骨转移患者，提取骨转移、非骨转移患者和健康人对照的血浆外泌体miRNA并对其测序，分析NSCLC骨转移患者的外泌体miRNA谱，探索骨转移患者中差异表达的外泌体miRNA。第二部分通过对39例接受高选择性MET抑制剂的患者按照骨转移进行分层分析，探索NSCLC骨转移患者接受MET抑制剂疗效，此外，在患者用药前后进行血液常规检查，探索外周免疫细胞的疗效预测价值。第三部分收集了54例接受免疫检查点抑制剂且进行MET蛋白检测的NSCLC患者，分析骨转移患者接受免疫检查点抑制剂治疗效果并且进一步分析MET蛋白表达程度能否作为其疗效预测因子。 结果第一部分：经过过滤后得到1287个外泌体miRNA，无监督聚类分析能够将NSCLC患者以及健康人区分开；权重共表达分析按照相关性将外泌体miRNA分成A、B、C三群，B群主要富集代谢相关通路，在NSCLC尤其是骨转移中差异表达；在骨转移患者中发现差异表达的三个miRNA，其中hsa-miR-574-5p较非骨转移患者显著下调,hsa-miR-328-3p和hsa-miR-423-3p显著上调。 第二部分：肺癌骨转移患者（N=19）与非骨转移患者（N=20）相比接受高选择性MET抑制剂治疗效果为非劣效，二者无进展生存期没有显示出显著差异（HR=0.8，95%CI：0.43-1.51）；MET抑制剂治疗后所有患者外周血中性粒细胞绝对值较基线显著下降（P＜0.01），并且在对药物响应的患者中中性粒细胞下降明显（P＜0.01）。 第三部分：肺癌骨转移患者（N=18）较非骨转移患者（N=36）相比接受免疫检查点抑制剂治疗效果为劣效（HR=0.42，95%CI：0.18-0.97，P＜0.05），骨转移组中位PFS为4.7个月，非骨转移组中位PFS为12.9个月；骨转移联合MET进行亚组分析，MET蛋白高表达的非骨转移患者中位PFS为19.6个月，显著优于骨转移患者（P＜0.05），具有优于MET蛋白低表达非骨转移患者的趋势（HR=0.42，95%CI：0.14-1.24，P=0.08）。 结论(1)骨转移患者具有特殊的外泌体miRNA谱，差异表达的miRNA：hsa-miR-574-5p,hsa-miR-328-3p和hsa-miR-423-3p，未来或能成为NSCLC骨转移患者的生物预测标志物。 (2)晚期NSCLC患者骨转移和非骨转移相比，接受高选择性MET抑制剂治疗没有显著疗效差异。高选择性MET抑制剂用药后外周血中性粒细胞绝对值显著下降，并且下降百分比与疗效相关。 (3)骨转移NSCLC患者使用免疫治疗效果较非骨转移患者差，MET蛋白高表达的非骨转移患者疗效更好，MET蛋白高表达可能是非骨转移患者使用免疫治疗的疗效预测标志物。
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