摘要
目的： 通过对糖尿病大鼠进行通脉增视饮灌胃治疗，观察视网膜组织中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平，评估通脉增视饮对糖尿病大鼠视网膜炎症因子表达的影响，并探讨通脉增视饮对糖尿病大鼠视网膜病变影响的可能机制。 方法： 60只SD雄性大鼠，适应性喂养1周，随机抽取10只作为空白对照组，剩余50只大鼠按照60mg/kg链脲佐菌素进行一次性腹腔注射以制备糖尿病模型，以两次（72h及1周后）空腹血糖均≥16.7mmol/L作为造模成功的标准，成模后随机分组：糖尿病模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组及多贝斯组共5组，每组各10只。造模成功次日中药高、中、低剂量组大鼠分别以浓度为22g/kg、11g/kg、5.5g/kg的通脉增视饮进行灌胃治疗，多贝斯组给予浓度为107mg/kg多贝斯胶囊灌胃治疗，各组大鼠灌胃1次/日，共12周。实验期间观察各组大鼠的生长状态，定期（第0、2、4、6、8、12周）测量大鼠的血糖和体重，第12周末在腹腔麻醉下摘取大鼠眼球制备石蜡切片，HE染色后观察比较各组大鼠视网膜组织的形态学差异，使用免疫组织化学法观察视网膜组织中ICAM-1和TNF-α的表达水平。 结果： 1.一般情况：造模后及灌胃期间，空白对照组大鼠精神良好，反应灵敏，形体健壮，行动敏捷，毛发淡黄、润泽；与空白对照组对比，糖尿病模型大鼠弓背，皮下脂肪明显减少，毛发色黄、枯槁，形体枯瘦，行动无力，精神萎蔫，部分大鼠较暴躁，具有攻击性，偶有大鼠出现皮肤溃疡、生殖器脱垂等现象。与糖尿病模型大鼠比较，通脉增视饮干预大鼠精神尚可，皮毛较为润泽，行动较为敏捷，形体适中，其中以高剂量组最为明显。造模8周时部分大鼠开始出现晶体混浊情况，12周时大部分大鼠出现晶体全混。血糖情况：空白对照组大鼠在实验过程中一直维持在正常水平，造模后糖尿病组、中药干预组及多贝斯对照组大鼠血糖无显著性差异，且各组血糖均大于正常对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。体重情况：造模前，各组大鼠的体重测得数据在统计学上无显著差异。灌胃2周后，空白对照组体重高于其余各组；第8周及第10周时，中药中剂量组体重所测得数据较模型组重；第4周后，中药高剂量组体重测得数据较模型组高。以上差异均具有统计学意义，P＜0.05。 2.ICAM-1及TNF-α表达：ICAM-1在感光细胞层、神经节细胞层、内丛状层及外丛状层均有阳性表达，以感光细胞层最为突出。TNF-α在视网膜各层组织均有阳性表达。关于ICAM-1及TNF-α平均光密度值的计算结果，各治疗组与模型组较空白对照组明显升高；与模型组相比，各治疗组显著降低；其中，通脉增视饮高剂量组ICAM-1AOD值显著低于多贝斯组，以上数据差异具统计意义（P＜0.05）。通脉增视饮高剂量组TNF-αAOD值虽然低于多贝斯组但不具有统计学意义（P＞0.05）。 3.视网膜组织形态学改变：空白对照组大鼠网膜平整，结构层次分明，各层细胞体积大小正常，无异常增生等病变。糖尿病模型组大鼠网膜结构紊乱，内界膜凹凸不平，各层细胞大小不均，排列紊乱，RGC层细胞明显减少，细胞肿胀，INL及ONL层组织疏松，间质水肿，偶见血管不规则扩张，但未见出血。通脉增视饮低剂量组大鼠内界膜疏松，表面欠光滑，RGC、INL及ONL组织水肿，细胞肿胀，排列欠规则。通脉增视饮中、高剂量组病变较轻，表现在各层组织排列较规则以及轻微的细胞肿胀。多贝斯组大鼠可见各层组织轻度水肿，RGC层细胞呈现空泡样改变，偶见视网膜毛细血管不规则扩张。 结论： 1.通脉增视饮可以有效改善糖尿病大鼠的一般情况，随着灌胃时间的延长，这种效果更加突出，但对血糖无明显降低作用。 2.通脉增视饮能降低DR早期视网膜中ICAM-1和TNF-α的过表达，表明其在一定程度上减弱了炎症对于DR的影响。 3.通脉增视饮对于DM大鼠早期视网膜病变具有一定的减轻作用，可以在一定程度上缓解高血糖状态下的视网膜细胞损伤性改变。
NETL