摘要
目的: 2018年国家中医药管理局颁布了《古代经典名方目录（第一批）》，在100首方剂之中，圣愈汤位于第48首，主治恶疮出血，心烦不安，不得睡眠等。现代临床应用广泛，但是并没有与之相关的药学研究内容，难以用现代化的指标对其进行衡量，因此，对其进行物质基准研究显得尤为重要。 研究目的是通过古籍文献考证确定经典名方圣愈汤的关键信息，明确药味基原以及饮片的炮制方法，通过单因素考察实验选择煎出率最高的物质基准制备工艺，并运用超高效液相色谱（UPLC）以及薄层色谱法（TLC）对圣愈汤物质基准中的指标性成分进行定性及定量分析。 方法： 1、经典名方的关键信息考证。按照国家中医药管理局颁布《古代经典名方目录（第一批）》记载的圣愈汤的关键信息进行考证，包括药味产地变迁以及植物性状、饮片炮制方法、古今剂量折算标准、方剂用法用量以及功能主治等内容。并将收集到的多批次药材加工成饮片，按照2015版《中国药典》标准对饮片进行质量检查，确保研究中所使用的饮片质量合格。 2、圣愈汤物质基准冻干粉的制备工艺考察。考察内容结合《医疗机构中药煎药室管理规范》，对圣愈汤煎煮以及冻干粉制备过程进行研究，并确定效率较高、工艺验证结果稳定的方法，根据研究结果选择多批次饮片随机组合，制备15批次圣愈汤物质基准冻干粉并测定出膏率与水分值。 3、圣愈汤物质基准冻干粉指纹图谱研究。使用超高效液相色谱仪对圣愈汤中的化学成分进行分析研究，根据其化学性质不同建立2套指纹图谱。方法建立过程中依次考察了不同品牌色谱柱、不同柱温、不同流速、不同流动相等因素对色谱图的影响，另外对供试品处理方法进行考察，考察内容包括不同提取溶剂、不同提取方式、不同提取时间等，确定了指纹图谱研究方法。 4、圣愈汤物质基准冻干粉中指标性成分含量测定。根据已建立的指纹图谱方法，采用外标法测定含量，并进行15批次物质基准冻干粉指标性成分的含量测定研究，建立其含量范围标准。 5、圣愈汤物质基准的薄层色谱研究。根据组成的药味用药典记载的方法进行初步的探究，结合药典要求与指纹图谱研究结果，选择合适的供试品处理方法、定性指标成分、展开剂组成及比例等条件，对冻干粉中的化学成分进行薄层色谱研究。 结果： 关键信息考证结果显示，古籍记载的相关药材与2020版《中国药典》记载相同。宋金元时期一分折合现代计量标准为0.4g，一大盏为600mL，一盏为300mL，“麻豆大”即为过4目筛不过10目筛的大小。饮片质量检查结果符合药典要求。 制备工艺的考察结果显示，煎煮前饮片不需要浸泡，煎煮过程中需要加盖，制备过程中为增加冻干粉的产量，应选择单倍量煎煮后混合低温减压的方式对煎液进行浓缩。 指纹图谱研究结果显示，使用超高效液相色谱仪根据成分的化学性质不同建立2套指纹图谱，指纹图谱1有27个共有峰，通过对照品相对出峰时间的比较指认9种成分，对其中7种进行含量测定；指纹图谱2有16个共有峰，同法指认8种成分，测定4种含量。对2种色谱方法分别进行方法学研究，结果符合2020版《中国药典》的要求。运用考察好的色谱条件对15批次圣愈汤物质基准冻干粉进行含量测定，共测定了11种指标性成分的含量，15批圣愈汤中绿原酸，阿魏酸，毛蕊异黄酮葡萄糖苷，毛蕊花糖苷，洋川芎内酯I，洋川芎内酯H，洋川芎内酯A，人参皂苷Rg1，人参皂苷Re，人参皂苷Rb1，黄芪甲苷的质量分数范围分别为0.063~0.193，0.509~0.638，0.160~0.318，0.012~0.056，0.394~0.519，0.110~0.143，0.031~0.097，0.382~0.595，0.292~0.505，0.590~0.803，0.142~0.367mg·g-1。各成分分别来自于6味药材，可以较为全面的表征圣愈汤物质基准的质量。 薄层色谱研究结果显示，使用药典方法并结合文献记载方法，建立了其中四个药味的薄层色谱方法，对相关成分的定性研究结果佐证了指纹图谱的结果，并应用建立的薄层色谱方法对15批次冻干粉进行了定性研究。 结论： 圣愈汤的物质基准研究当中，通过考证确定了经典名方关键信息，考察了物质基准冻干粉的制备工艺，建立了2种指纹图谱研究方法，测定了其中11种指标性成分的含量，并结合了薄层色谱研究方法来较为全面地表征物质基准冻干粉的质量，通过对15批次冻干粉的研究，建立了经典名方圣愈汤物质基准的质量表征方法，为后续相关研究提供参考依据。
NETL