摘要
普氏蹄蝠（Hipposiderospratti），隶属于翼手目（Chiroptera）蹄蝠科（Hipposideridae），在我国主要分布于中南部各省，河南省仅分布于南阳市。普氏蹄蝠是典型的洞穴型蝙蝠，由于其栖息的许多洞穴被开发成旅游景点，严重干扰了该物种的生存，人为捕杀、农药和杀虫剂的使用等因素使得该物种的种群数量正在急剧减少。为了弄清河南省普氏蹄蝠遗传多样性现状，为该物种提供科学的管理和保护措施，利用RAPD与微卫星标记研究了河南省南阳市4个洞穴（西峡、内乡、南召、军马）74个普氏蹄蝠的群体遗传多样性，分析了群体的遗传分化、遗传结构等，并检测群体是否经历瓶颈效应。结果如下： 1.从已发表序列中筛选出8条RAPD引物与6对微卫星引物，对河南省四个普氏蹄蝠群体进行扩增，RAPD引物共扩增出条带91条，平均多态率为77.3%，多态位点平均占比（P）为50.00。微卫星标记共检测到等位基因25个，平均每个位点检测到4.17个，位点的平均多态信息含量（PIC）为0.498，所有引物均具有多态性。 2.基于RAPD数据，四个普氏蹄蝠群体的观察等位基因数（Na）为1.43~1.62，有效等位基因数（Ne）为1.33~1.49，Shannon信息指数（I）为0.2625~0.3805；基于微卫星数据，普氏蹄蝠群体的观察等位基因数（Na）为2.83~3.83，有效等位基因数（Ne）为2.03~2.79，无效等位基因频率为0.017~0.159，Shannon信息指数（I）为0.7955~1.0996，RAPD与微卫星数据反映出一致的结果：四个群体的遗传多样性有明显差异，南召（NZ）遗传多样性最为丰富，内乡（NX）遗传多样性最差。 3.基于微卫星数据，普氏蹄蝠群体观察杂合度（Ho）为0.298~0.531，期望杂合度（He）为0.422~0.610，Nei’s期望杂合度为0.412~0.595，多态信息含量（PIC）为0.382~0.541，该结果说明普氏蹄蝠群体内部存在近交行为，南召（NZ）呈高度多态（PIC?0.5），西峡（XX）、军马（JM）、内乡（NX）三个群体呈中度多态（0.25＜PIC＜0.5）。在四个群体的六个位点上进行了24次哈迪-温伯格检验，其中，16次结果偏离哈-温平衡。 4.基于微卫星数据计算F-统计量，普氏蹄蝠个体近交系数（Fis）为-0.0754~0.3714，群体近交系数（Fit）为0.0064~0.4245，两者均为正值，表明普氏蹄蝠群体存在近亲繁殖的现象（Fis＞0，Fit＞0）。 5.基于RAPD与微卫星数据分析群体分化水平，普氏蹄蝠群体遗传分化系数（Fst）分别为0.2236、0.0614，群体内部遗传变异分别占总变异的77.64%、75.39%，四个群体平均基因流分别为1.7364、3.8206，说明群体内部遗传变异是引起普氏蹄蝠群体变异的主要因素，基因流大于1表明群体间存在一定程度的基因流动。RAPD认为普氏蹄蝠群体呈高度遗传分化，微卫星标记认为群体间为中等分化，两者结果不同，表明在研究群体遗传多样性时运用多种分子标记能够更综合、准确的评估群体遗传状况。 6.基于RAPD与微卫星数据分析种群遗传结构，普氏蹄蝠两两群体间Nei’s遗传一致性（GI）分别为0.9002~0.9456、0.8834~0.9578，遗传距离（GD）分别为0.0559~0.1051、0.0431~0.1240，结果表明，内乡（NX）与军马（JM）的亲缘关系最近，西峡（XX）与南召（NZ）的亲缘关系最远，群体间整体遗传分化较小。 7.基于微卫星数据，检测普氏蹄蝠四个群体是否经历过瓶颈效应，结果显示，在无限等位基因模型（IAM）、二阶突变模型（TPM）、逐步突变模型（SMM）三种模型下仅西峡（XX）经历显著瓶颈效应（P＜0.05），而在前两个模型下，南召（NZ）、西峡（XX）两个群体经历显著瓶颈效应（P＜0.05）。内乡（NX）在TPM与SMM两种模型下表现为杂合度缺失（He＜Hd），西峡（XX）、南召（NZ）、军马（JM）在三种模型下均表现出杂合度过剩（He＞Hd），基因分布呈典型的“L-shaped”型。 综上，筛选的RAPD引物与微卫星引物具有多态性。普氏蹄蝠群体内部存在近交，群体间存在分化，遗传距离各不相同。四个普氏蹄蝠群体中遗传多样性最丰富的为南召（NZ），其次为军马（JM）、西峡（XX），内乡（NX）遗传多样性最低，主要变异因素为群体内部遗传变异。南召（NZ）、西峡（XX）经历了显著瓶颈效应，对该地普氏蹄蝠种群进行科学有效的管理十分必要。
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