摘要
为了筛选出影响宁夏优质肉羊生长发育的候选基因，本研究以宁夏优质肉羊新品种培育工作巾的杜泊、小尾寒羊、滩羊三个亲本群体及其杂交后代作为研究对象，利用靶向测序技术检测三个亲本群体的GHR、GHRH、GHRL基因差异位点，并进行了外显子区错义突变的生物信息学分析;利用MassArray基因分型技术检测杂交后代差异位点基因型，分析了不同基因型与生长性状的关联性;利用qRT-PCR技术对存在关联性的基因进行不同组织的表达分析，并进一步对存在启动子突变的GHRH基因进行了SNP突变与基因表达量的关联分析。主要研究结果如下: 1.通过靶向测序技术对3个品种共91只绵羊的GHR、GHRH、GHRL基因部分片段进行测序，筛选到了41个群体问差异显著的位点，表明三个基因在杜泊羊、滩羊、小尾寒羊三个不同品种间存在显著差异。 2.通过MassArray基因分型技术对384只杂交后代羊中差异位点进行基冈分型并与生长性状进行关联分析。结果显示:GHR基因外显子区域的33627336位点CC、CT基因型个体初生各项指标极显著(P＜0.01)高于TT基因型个体，其六月龄体长显著(P＜0.05)高于TT基因型个体;33661895位点GG、AG基因型个体初生体高、胸围、三月龄体长均显著高于AA基因型个体(P＜0.05)，AG基因型个体三月龄体重显著高于从型(P＜0.05);两个位点组成的双倍型H1H2、H2H2、H1H4、H2H4型个体各时期各项指标均高于H1H3、H3H3、H3H4型个体且有一定差异性。GHRII基因69000912、69001024、69001075、69001149位点与个体各项指标均无显著关联。GHRL基因外显子区域的56243223位点TG基因型个体六月龄体高显著高于GG型(P＜0，05):56243237位点TA型个体六月龄体重、体高、体长均显著高于TT型(P＜0.05);H1H2双倍型个体六月龄体高、胸围显著高于H2H2型个体(P＜0.05)。 3.通过qRT-PCR技术对三个基因的组织表达进行了研究，发现三个基因主要在肝脏、大脑和垂体组织中表达，在肌肉组织中的表达水平较低。GHRH基因上游区域的69000912位点SNP突变与基因在大脑组织中的表达量有关，GT型显著高于TT型(P＜0.05)。 综上所述，GHR基因33627336和33661895位点以及GHRL基因56243223和56243237位点与绵羊生长性状有一定相关性，在育种工作中有一定参考价值，可将其作为肉羊生长发育和产肉性能的候选基因位点进行进一步的研究。
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