摘要
红树林有着独特的生态环境,如高盐度、低氧气、营养限制、潮汐渐变、高温以及强光等，这种高温又潮湿的环境造就了一群能够产生具有新颖结构次级代谢产物的微生物。在这些微生物中，植物内生真菌因植物体内丰富的营养环境更有可能产生具有生物活性且结构新颖的天然产物。因此，红树林生态系统中植物内生真菌极具研究价值。 本文从课题组菌株资源库中选择了PenicilliumjanthinellumHDN13-309和Cladosporiumsp.HDN13-314两株红树林植物内生真菌进行其次级代谢产物的研究，旨在获取更多具有抗肿瘤活性的化合物；此外，通过对菌株HDN-309培养条件的优化对高活性化合物量的积累进行了探索研究。 首先，对两株目标研究菌株进行大发酵，利用VLC、PLC、MPLC、HPLC等手段对所得粗浸膏进行分离纯化，分离得到单体化合物26个；利用UV、IR、MS及NMR等波普技术确定了所有化合物的平面结构，其中新化合物8个，利用X-ray、CD量子化学计算的方法阐明了部分新化合物的绝对构型。从菌株HD13-309中分离得到新化合物6个，包括5个含有五元螺环呋喃环gliovirin类生物碱，其中2个Penisulfuranol类（2,3），2个Penisuloxazin类（1,5），1个硫桥断开并连有1,4-丁内酯衍生物片段的新颖的Penisulfuranol类（4）；1个二酮哌嗪类化合物（6）。从菌株HDN13-314中分到2个新化合物，包括1个含硫的大环内酯类（19）、1个大环内酯类开环产物（20）。继而，对所有化合物进行抗肿瘤活性的测试，结果显示化合物PenisuloxazinA（11）和PenisulfuranolA（7）具有强的抗肿瘤活性。为了对高活性化合物的抗肿瘤活性进行深入的体内外活性评价，本文对HDN13-309菌株培养条件进行了探索，经再次大发酵制备，结合分子量追踪分离获得目标产物PenisuloxazinA76mg和PenisulfuranolA54mg，分别比初始条件提高了10倍。 综上所述，本论文从两株红树林来源的内生真菌中共得到化合物26个，其中新化合物8个，包括6个ETP类化合物（1-6），2个大环内酯类化合物（19-20），首次发现连有1,4-丁内酯衍生物片段的gliovirin类生物碱。本文还通过对菌株HDN13-309发酵条件的摸索提高了PenisuloxazinA和PenisulfuranolA产量，为后续药物先导化合物的研究提供了基础。
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