摘要
抗生素疗法所引发的不良后果已成为困扰奶牛乳房炎防控的难题，研发绿色高效低毒的抗生素替抗品意义重大。中药提取物中有效活性成分含量、抑菌消炎效果相对稳定，又具有低毒低残、不易产生耐药性等诸多优势，其开发应用成为研究热点。本研究从邯郸地区4个奶牛养殖场分离奶牛乳房炎致病菌并分析其耐药性，探究中药有效成分对乳房炎模型小鼠的治疗效果，为利用中药有效成分治疗奶牛乳房炎提供理论依据。主要研究结果如下： 1.邯郸地区4个奶牛养殖场奶牛乳房炎致病菌分离鉴定。采集邯郸地区4个奶牛养殖场奶牛乳房炎奶样38份，根据细菌培养特性、菌体革兰氏染色镜检特征、细菌生化鉴定和16SrDNA基因鉴定结果，共分离到金黄色葡萄球菌（15/49株）、无乳链球菌（11/49株）、大肠杆菌（12/49株）、沙门菌（11/49株），其中金黄色葡萄球菌的分离率最高，为30.61%。 2.金黄色葡萄球菌耐药性分析及对其作用明显的中药有效成分筛选。利用纸片法检测分析15株金黄色葡萄球菌对14种临床常用抗生素耐药性，以及利用牛津杯法测定9种中药有效成分（山楂酸、芍药苷、穿心莲内酯、黄芩苷、桂皮醛、黄连碱、姜黄素、茯苓酸、牛至油）体外抑菌效果。结果表明15株金黄色葡萄球菌对青霉素、氯霉素、头孢呋新、头孢唑肟等药物中度敏感；体外抑菌试验结果表明黄连碱、黄芩苷、桂皮醛抑菌效果最佳，其抑菌圈直径（mm）分别为：黄连碱（39.06±0.69）、黄芩苷（36.18±0.36）、桂皮醛（33.38±0.45）。 3.金黄色葡萄球菌致小鼠乳房炎模型的建立。通过向产仔后7天小鼠乳腺组织注射20μL浓度为1×107cfu/mL金黄色葡萄球菌菌液后，小鼠乳腺组织病理变化具备小鼠乳房炎病理特征。 4.中药有效成分治疗金黄色葡萄球菌诱发小鼠乳房炎效果研究。利用小鼠乳房炎感染模型，经黄连碱、黄芩苷、桂皮醛连续处理5d，与模型组相比，发现黄连碱、黄芩苷、桂皮醛均能不同程度降低小鼠体内促炎因子（IL-1和TNF-α）mRNA相对表达量，并显著增加抗炎因子（IL-10）和免疫球蛋白（IgG1、IgG2、IgA和IgM）mRNA相对表达量，表明其对金黄色葡萄球菌感染小鼠所致乳房炎治疗效果最好。通过观察病理切片，黄连碱组乳腺细胞内炎性浸润消失，腺泡逐渐趋于完整，细胞核浓染消失，其治疗效果最好。
NETL