摘要
真菌的次级代谢产物极其丰富，是活性天然产物的来源之一。真菌液体发酵调控，是获得结构新颖化合物的重要手段。为寻找天然安全、高效的新型抗酪氨酸酶活性化合物，本文选取两株药用真菌，对其次级代谢产物及其酪氨酸酶抑制活性进行了研究。 本研究采用添加外源化学物质的方法对两株药用真菌—竹黄菌、竹荪进行液体发酵调控，利用硅胶、十八烷基键合硅胶、葡聚糖凝胶LH-20等柱层析及高效液相（HPLC）技术，从两株真菌发酵液中共分离得到了13个化合物，运用MS、HRMS、1H-NMR、13C-NMR、NOESY、HMBC、COSY等多种波谱法及X-ray单晶衍射技术鉴定了8个化合物的结构，并通过L-多巴氧化法筛选出了具有抑制蘑菇酪氨酸酶二酚酶活性的化合物。主要内容如下： 向竹黄菌（Shiraiabambusicola）的液体培养基里添加100mM的丁酸钠（组蛋白去乙酰化酶抑制剂），发酵培养8天后，从竹黄菌发酵液中分离出了8个化合物（1-8），解析出了4个化合物，分别为6-甲基水杨酸（1），曲地酸甲酯（2），3,6,8-三羟基-1-甲基口山酮（3），曲地酸（6）。化合物1，2，6均为首次从竹黄中分离得到。进一步的蘑菇酪氨酸酶抑制活性实验表明，化合物2，3为混合型酪氨酸酶抑制剂，对蘑菇酪氨酸酶有显著的抑制作用，半抑制浓度（IC50）分别为57.56，51.93μM。化合物1为竞争型酪氨酸酶抑制剂，对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用较弱，IC50值为109.13μM。 向竹荪（Dictyophoraindusiata）液体培养基加入0.5g/L2-氨基苯甲醇，发酵培养7天后，从竹荪的发酵液中分离得到5个化合物（9-13），鉴定出了4个化合物（10-13）的结构，分别为1,3-二羟基-2,4-二甲基苯（10），2-(2-aminobe-nzylamino)benzyl(2-((2-((2-aminobenzyl)amino)benzyl)amino)phenyl)methanol（12），(2-((2-((2-((2-aminobenzyl)amino)benzyl)amino)benzyl)amino)phenyl)methanol（13）。化合物11-13分别为2-氨基苯甲醇的二聚体，三聚体，四聚体，其中，化合物12，13为新化合物。蘑菇酪氨酸酶抑制活性实验表明，化合物9和13对蘑菇酪氨酸酶有抑制作用，两者均为竞争型抑制剂，IC50分别为109.81，69.89μM。 本研究为新颖天然产物的获得提供新的思路与依据，为抗癌药物、美白产品和食品保鲜剂的开发应用提供一定的理论基础。
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