摘要
番茄白粉病日趋严重，种植抗病品种是最经济、有效的解决途径。病原菌的鉴定、侵染过程观察是病害防治、抗病种质资源创新与新品种选育的基础。本研究以银川地区番茄白粉病病原分离物为试验材料，从分生孢子、芽管、分生孢子梗和附着胞等方面对其进行形态学鉴定，并利用ITS区序列进行分子生物学鉴定，确定引起银川地区番茄白粉病病原菌的种属;以水琼脂平板法为对照(CK)，对比I2-KI染色法、2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法、亚甲基蓝染色法和固绿染色法共4种方法下孢子的生活力及染色效果，筛选番茄白粉病菌孢子活力检测的最佳方法:对比30d、60d和90d共3个时间下，低温保存法、甘油保存法和二甲基亚砜保存法与不同保存条件组合共9个处理后的孢子萌发率和接种感病品种Moneymaker(MM)后的病情指数，筛选番茄白粉病菌最佳保存方法:对接种白粉病菌0h、4h、8h、12h、24h、48h、96h、120h、168h的感病番茄品种MM叶片进行考马斯亮蓝染色，光镜下对番茄白粉病菌的侵染过程进行观察;利用L9(34)正交试验筛选番茄白粉病室内苗期抗病性鉴定的最佳方法;在此基础上对30份番茄种质资源进行抗病种质资源评价。研究结果表明: 1.银川市番茄白粉病病原菌分生孢子单生，呈卵圆形或腰鼓状，其顶端位置萌发出芽管，芽管末端生有乳突状附着胞，附着胞亦着生于菌丝上，分生孢子梗直立不分枝，未发现闭囊壳，根据上述病原菌形态特征初步判断其为新番茄粉孢菌(Oidiumneolycopersici);通过ITS区多序列比对，构建系统进化树，其与Oidiumneolycopersici的一致性达99％以上。经过形态学与分子生物学鉴定，结果一致表明引起银川市番茄白粉病的病原菌为Oidiumneolycopersici. 2.亚甲基蓝染色法测定的孢子活力染色效果稳定，分生孢子活力达到53.08％，与I2-KI染色法和CK无显著性差异，最适合作为番茄白粉病菌分生孢子活力快速检测方法;I2-KI染色法测定的分生孢子活力最高，为54.49％，但是I2-KI染色法着色不均匀，不利于观察统计;固绿染色法测得的活力最低，TTC染色法对白粉病菌分生孢子染色无效果，孢子不着色。 3.4℃低温保存法保存30d和60d时孢子萌发率、病情指数分别为44.2％、22.5和39.6％、22，均显著高于其他8个处理。90d时，4℃低温保存法孢子萌发率、病情指数为27.5％、16.3，与-20℃(24h)转-80℃二甲基亚砜保存法无显著性差异，两者显著高于其他7个处理。8个处理中，番茄白粉病菌保存效果最佳的是4℃低温保存法。 4.番茄白粉菌在叶片接种后4h开始萌发，分生孢子顶端萌发产生芽管;接种后8h，芽管上着生附着胞;接种后12h，附着胞下产生吸器;接种后24h，产生初生菌丝;接种后48h，产生次生菌丝，菌丝上亦着生附着胞;接种后96h，番茄叶片表面形成大量菌丝，并出现分生孢子梗;接种后120h，菌丝上着生的分生孢子梗顶端形成分生孢子;接种后168h，菌丝大量形成，每条菌丝不断分枝，呈辐射状蔓延在番茄叶片上。 5.番茄室内苗期接种白粉病菌的最佳方法是苗龄为4叶期采用浓度106/mL的孢子悬浮液刷叶法接种于叶片正面，并保湿24h。30份番茄种质资源中免疫材料0份;抗病材料1份，为62850-1;中抗材料12份;感病材料16份;高感材料1份，为62754-1。 以上研究为番茄白粉病防治和抗病育种提供理论依据和参考。
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