摘要
本研究以中国EH患者为研究对象，研究中国EH患者中CYP11B2基因各基因型以及等位基因的出现频率，并比较与其他国家人群基因型及等位基因频率的差异，同时探究CYP11B2基因多态性与中国EH患者发生心血管事件之间的关系，此外进一步探讨了CYP11B2基因多态性与老年EH患者左心室肥厚(Left Ventricular Hypertrophy，LVF)、心房纤颤(Atrial Fibrillation，AF)等相关常见心血管疾病发生的相关性，以及其对降EH药物使用疗效的影响，为中国EH患者临床治疗中减少心血管事件的发生提供理论依据及指导意义。 第一部分 醛固酮合成酶(CYP11B2)基因-344C/T多态性与中国高血压患者心脑血管事件的关系研究 目的：CYP11B2基因-344C/T多态性与EH患者心脑血管事件发生的相关性研究所得结论不一致。在健康个体中-344C/T等位基因频率和心脑血管疾病发病率在不同种族间存在差异，因此这些研究结果可能不适用于中国人群。此外，研究大多数都是在健康人群中进行的，至少在一定程度上无法证明EH患者的基因相关性。因此，对于-344C/T的等位基因是否影响EH患者心脑血管疾病的发病率，需要在基于EH患者的队列研究中得到证实。因此-344C等位基因是否影响中国EH患者心脑血管疾病的发病率尚不清楚，需要进行探究。 方法：本研究通过对2004年6月至2006年5月在河北省人民医院和首都医科大学宣武医院连续招募的820例在门诊确诊为EH的患者作为研究对象，进行临床调查：(1)应用TaqMan real-time PCR的方法检测所有患者CYP11B2基因分型；(2)对所有研究对象进行11年随访，记录主要不良心血管事件(MACEs)，包括卒中、冠状动脉疾病(Coronary Artery Disease,CAD)和冠状动脉疾病死亡以及心血管事件发生情况；(3)采用已建立的心血管危险因素调整多变量进行Cox比例风险模型分析，数据采用SPSS17.0进行统计分析。 结果：1.研究对象的一般临床资料：本项研究共纳入820例EH患者，其中65例EH患者因失访而被排除。其余755例EH患者中，男性399例，女性356例，年龄60.52±12.61岁。 2.研究对象CYP11B2基因型分型结果：T等位基因纯合型(TT基因型)282例(37.4%)；杂合型(CT基因型)361例(47.8%)，C等位基因纯合型(CC基因型)112例(14.8%)。各组间年龄和性别比无统计学差异。与CYP11B2基因型没有进一步的显著相关性。 3.心血管事件发生情况：在平均7.60±1.12年的随访期后，CYP11B2基因CC基因型患者的MACEs事件发生率明显高于CT和TT基因型患者。 4.危险因素风险评估：CYP11B2基因CC变异是MACEs事件、CAD、卒中疾病发生的显著且独立的预测因子。 小结：CYP11B2-344CC基因型是EH患者发生CAD和脑卒中的危险因素，独立于中国EH患者已有的其他心血管危险因素，可作为EH患者心血管事件的危险预测因子，但对该基因型变异的机制需进一步研究。 第二部分 醛固酮合成酶(CYP11B2)基因-344C/T多态性与老年原发性高血压患者左心室肥厚的相关性研究 目的：本部分研究通过对CYP11B2基因-344C/T位点与老年EH并发LVH患者进行相关性分析，探讨此位点变异基因型与LVH的关系，为中国EH并发LVH患者的诊治提供理论依据。 方法：选取2015年4月~2016年10月在河北省人民医院心内科及首都医科大学宣武医院心内科门诊确诊的老年EH患者434例，所有入选患者详细询问病史、体检并完成各项相关检查：血压、身高和体质量检测，计算体体重指数(BMI)、心电图检查、超声心动图检查、血常规、尿常规及生化检查、CYP11B2基因多态性检测，采用多元逐步回归分析基因与LVH的相关性。使用SPSS22.0统计软件进行数据分析。 结果：1.研究对象的一般临床资料：本研究共纳入研究者434例，其中男性171例，女性263例，平均年龄65.32±4.32岁。 2.研究对象CYP11B2基因型分型结果:进行基因分型后，3种基因型患者的基因位点分布：TT、CT、CC3种基因型分别为149例(34.3%)、232例(53.5%)、53例(12.2%)。T等位基因60.9%，C等位基因39.1%。3种基 因型患者一般资料比较，差异无统计学意义(Pgt;0.05)。 3.多元逐步回归分析：-344C/T位点CC基因型患者的LVPWT、LVM 及LVMI显著高于CT和TT基因型患者[(11.46±0.97)mm vs.(10.01±0.95)mm、(10.18±0.89)mm，P=0.000，(95.39±20.76)g/m2vs.(84.73±12.68)g/m2、(79.81±14.53)g/m2，P=0.000，(174.69±31.27)g vs.(151.85±16.24)g、(146.08±19.08)g，P=0.007]。多元逐步回归分析显示，校正年龄、性别、服用降压药物种类、BMI、吸烟史、饮酒史、TG、TC、LDL-C、HDL-C、心率、血压及空腹血糖后，-344C/T型与LVMI密切相关(Plt;0.001)。 小结：CYP11B2基因-344C/T存在基因多态性，C等位基因可能是EH患者LVH发生的独立危险因素；中国老年EH携带CC基因型患者发生MACEs及死亡的风险较高，可能与EH患者CC基因型患者发生LVH有关联性。 第三部分 醛固酮合成酶(CYP11B2)基因-344C/T多态性与中国高血压患者房颤关系研究 目的：目前CYP11B2基因-344C/T多态性与AF的相关性报道尤其是其在EH患者中的相关性研究报道较少，且研究结果不一致，并且这些基因型频率也明显受到种族、性别、环境等外界因素的影响而导致其出现差异性，在本部分研究中，将探索评估中国人群EH患者中AF与CYP11B2基因-344C/T多态性是否存在相关性，从而为AF及EH个体的遗传易感性和药物反应性差异提供分子遗传学基础。 方法：连续招募河北省人民医院及首都医科大学宣武医院2017年5月至2020年11月心内科门诊和病房收治的310例有AF记录的EH和相匹配的无AF病史的EH患者310例（对于每个病例患者，在同一时期内选择一个匹配的没有AF的EH患者作为对照）。两组患者是独立的，性别和年龄相匹配，年龄差异均不超过5岁。本研究对所有受试者详细询问病史、进行体格检查并完成各项相关检查：血压、身高和体体重指数检测，计算体重指数(BMI)；行M型超声心动图和二维经胸超声心动图测量左房和左室尺寸，采用Simpson法评定左心室射血分数(Left Ventricular Ejection Fraction,LVEF)，并根据超声心动图参数和Devereux公式计算LVMI；采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测技术检测CYP11B2基因多态性确定基因分型，采用多元逐步回归分析基因型与LVH的相关性；Logistic回归分析AF危险因素；使用SPSS22.0统计软件进行数据分析。 结果：1.研究对象的一般临床资料：本研究实验组(EH合并AF)患者310例，其中男性158例，女性152例，平均年龄61.9±9.8岁；对照组(EH非AF) 患者310例，其中男性158例，女性152例，平均年龄61.5±9.6岁。两组患者在年龄、血压、性别分布、糖尿病发生率、吸烟饮酒生活习惯等方面差异均无统计学意义(Pgt;0.05)。AF患者的LAD明显大于对照组(Plt;0.001)。同样，AF患者IVS、LVEDD大小和LVMI也显著高于对照组(Plt;0.001)。两组LVPW、LVEF差异无统计学意义(Pgt;0.05)。 2.研究对象CYP11B2基因型分型结果：进行基因分型后3种基因型(TT、TC和CC)在实验组患者中的分布分别为：41.9%、50.6%和7.4%；在对照组患者中的分布分别为48.4%、44.5%和7.1%(χ2=2.675,P=0.263)。CYP11B2基因的C等位基因频率在实验组患者(32.3%)与对照组患者(29.4%)之间差异无统计学意义(χ2=1.661,P=0.197)。 3.多元逐步回归分析：Logistic回归分析显示LAD和LVEDD是中国EH患者AF的独立预测因子(均Plt;0.001)。C等位基因携带者AF的RR=1.30,95%CI:0.95~1.78，P=0.107；调整LAD和LVEDD后为RR=1.13,95%CI:0.72~1.78,P=0.601。这些结果表明，在该人群中，没有发现AF和CYP11B2基因的-344C/T多态性之间的关联性。 小结：CYP11B2基因的-344C/T多态性与中国EH人群非家族性AF之间缺乏关联，但这种多态性可能与中国EH人群的心房重构有关。为了证实醛固酮合成酶在非家族性AF中的作用，以及醛固酮合成酶基因的遗传变异在AF中的作用，可能需要进行更大规模的临床研究或实验研究。
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