摘要
目的： 本实验旨在观察祛风通络方对5/6肾切除肾间质纤维化模型SD大鼠肾组织中TGF-β1、α-SMA的影响。 方法： 把54只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为假手术组和造模组（模型组、洛丁新组、祛风通络方高、中、低剂量组）。适应性喂养1周后，假手术组只分离肾包膜，不切除肾脏，造模组均采用5/6肾切除造模法建立SD大鼠肾间质纤维化模型。在造模后第8周开始对各组进行药物干预：祛风通络方高、中、低剂量组浓度分别给予2.32g/ml、1.16g/ml、0.58g/ml，洛丁新组为0.11mg/ml,假手术组和模型组给予同等体积的生理盐水，每天灌胃1次，干预4周后采集各组大鼠尿蛋白定量（24hUTP）、血肌酐（Scr）、血尿素氮(BUN)进行测定。采用MASSON染色进行观测大鼠肾脏组织纤维化病理变化；采用免疫组化法（IHC）测定5/6肾切除肾间质纤维化模型SD大鼠肾组织中转化因子TGF-β1、平滑肌肌动蛋白α-SMA的表达；采用实时荧光定量PCR技术（RT-PCR）检测肾组织中TGF-β1及α-SMA mRNA的表达。 结果： 1.肾功能生化指标：与假手术组比较，模型组BUN、Scr、24hUTP水平明显升高（P＜0.01）。与模型组比较，洛丁新组、祛风通络方各剂量组BUN、Scr、24hUTP均下降（P＜0.01），与洛丁新组比较，祛风通络方高剂量组BUN、24hUTP（P＞0.05），其Scr下降比较（P＜0.05）。中药各组组间比较，BUN、Scr水平差异无统计学意义（P＞0.05），24h UTP水平比较（P＜0.05）。 2.肾脏病理改变：MASSON染色镜下可见假手术组肾小管及间质、肾小球基底膜、系膜均可见少量蓝色胶原纤维沉积。模型组可见肾小管间质增宽,胶原纤维化形成明显增多,肾间质局灶性纤维化形呈大量的蓝色胶原纤维沉积。洛丁新组及祛风通络方各剂量组中蓝染物质均少于模型组，但仍高于假手术组，其中中药各组蓝染物质变化随剂量改变呈现梯度变化。 3.免疫组化测定：假手术组TGF-β1、α-SMA阳性表达非常少,只见间质内有少量的棕黄褐色颗粒。模型组阳性表达显著，见肾小管、肾小球、肾小管间质内均有大量的棕黄褐色颗粒。洛丁新组及祛风通络方各剂量组中棕黄褐色颗粒均少于模型组，但仍高于假手术组，其中中药各组棕黄褐色颗粒变化随剂量改变呈现梯度变化。计算IOD值，模型组TGF-β1及α-SMA表达均高于假手术组，且差异具有统计学意义（P＜0.05）；与模型组相比，洛丁新组及祛风通络方各剂量组TGF-β1及α-SMA表达均有不同程度下降（P＜0.05）。 4.RT-PCR检测：对目的基因进行相对定量分析，与假手术组对比，模型组TGF-β1m RNA、α-SMAmRNA表达均显著上调（P＜0.01）；与模型组相比，祛风通络方各组及洛丁新组的TGF-β1mRNA、α-SMAmRNA表达明显下降（P＜0.01），与洛丁新组相比，祛风通络方高、中剂量组差异（P＞0.05），祛风通络方低剂量组（P＜0.05）。 结论： 1.祛风通络方能降低5/6肾切除肾间质纤维化模型SD大鼠的尿蛋白、Scr、BUN值； 2.祛风通络方能改善5/6肾切除肾间质纤维化模型SD大鼠肾间质纤维化组织的病理变化； 3.祛风通络方能够降低5/6肾切除肾间质纤维化模型SD大鼠肾组织中TGF-β1、α-SMA的表达，从而抑制肾间质纤维化进程。
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