摘要
目的：研究压力作用下牙周膜细胞（PDLCs）自噬的产生，探究自噬在正畸牙移动（OTM）中对破骨分化的作用。 方法：选取90只小鼠建立OTM模型，通过WB、qPCR和免疫荧光检测自噬相关蛋白LC3II/I，BECLIN-1及基因Atg5、Atg12、Atg8的表达；通过3-MA和雷帕霉素改变自噬水平后用micro-CT观察OTM移动距离、根分叉处骨密度，HE染色观察根分叉处骨质和压力侧PDL形态，TRAP染色观察压力侧破骨细胞数量，qPCR检测破骨相关基因Ctsk、Mmp-9、Trap和Rankl/Opg，炎症相关基因Il-1、Il-6、Tnf-α的表达。体外提取人PDLCs并对其施加压力，WB、qPCR检测自噬相关蛋白LC3II/I、BECLIN-1及基因Atg5、Atg12、Atg8的表达；透射电子显微镜（TEM）和eGFP-mRFP-LC3检测评估自噬。WB、qPCR和ELISA进一步检测自噬对RANKL/OPG的作用。 结果：OTM7天后自噬相关蛋白LC3II/I、BECLIN-1及基因Atg5、Atg12、Atg8的表达均升高，在压力侧牙周膜（PDL）中自噬高表达；3-MA抑制自噬后OTM速度变快，骨密度降低，PDL紊乱，破骨细胞数量增加，破骨相关因子Ctsk、Mmp-9、Trap和Rankl/Opg及炎症相关基因Il-1、Il-6、Tnf-α的表达增加，而雷帕霉素促进自噬后则反之。对PDL加梯度时间和梯度力值压力后，自噬早期不断增强，在6小时达到高峰后逐渐下降，且自噬对轻力更敏感；TEM和eGFP-mRFP-LC3检测均看到明显的自噬。3-MA促进PDL表达RANKL/OPG，而雷帕霉素则反之。 结论：压力可激活PDLCs发生自噬；自噬可通过RANKL/OPG抑制破骨细胞及炎症来调控OTM，维持根分叉处骨密度，减少PDL损伤，改善牙周组织状况。
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