摘要
银耳、茯苓、香菇、猴头菇和竹荪是常见的药食两用菌,具有多种生物活性。多糖是其主要活性成分,具有抗炎、抗氧化、免疫调节等功效。目前研究报道多为某种多糖单独发挥作用,而将多糖进行复配的协同免疫调节研究还不多见。近年来研究发现,药食两用真菌多糖如香菇多糖、茯苓多糖、灵芝多糖和银耳多糖都具有增强免疫功能,但其激活人体免疫系统的途径和机理却并不相同。因此,根据作用机理的不同,将多种多糖进行复配组合以发挥协同作用,是开发多糖产品的一个新方向。本论文以银耳多糖、茯苓多糖、香菇多糖、猴头菇多糖和竹荪多糖为研究对象,借助巨噬细胞RAW264.7研究其单独及协同免疫调节作用,并进行比较,得出以下结论: 一、5种食用菌多糖单独作用于RAW264.7细胞时,均可刺激并激活RAW264.7的免疫调节功能,表现为显著促进RAW264.7细胞增殖,提高TNF-α分泌水平,增强其吞噬能力(p<0.05)。说明这5种食用菌多糖均具有免疫调节作用。其中,茯苓多糖促进细胞增殖效果稳定,在低剂量5μg/mL即可表现良好效果;提高TNF-α分泌水平和增强吞噬效果最显著的是香菇多糖(160μg/mL)。 二、通过两两复配、三三复配、四四复配和五五复配的方式,将5种食用菌多糖按均等比例进行复配,共得到26种复配多糖。所得复配多糖均能显著促进RAW264.7细胞增殖,提高TNF-α分泌水平,增强吞噬能力(p<0.05)。不同复配多糖的免疫调节能力存在差异。两两复配多糖中,复配多糖205(茯苓多糖-香菇多糖)促进吞噬的作用最佳,且其促进TNF-α分泌水平仅次于复配多糖208;三三复配多糖中,复配多糖301(银耳多糖-茯苓多糖-香菇多糖)提高TNF-α分泌水平和增强吞噬能力的效果最好;四四复配多糖和五五复配多糖的免疫调节作用相对于其他复配多糖较弱。26种复配多糖中,160μg/mL的复配多糖301提高TNF-α水平和增强吞噬效果最好。 三、将复配多糖与其组成多糖进行比较,初步发现效果较好的复配多糖如复配多糖205、复配多糖301,其免疫调节能力优于其组成多糖。在此基础上选择复配多糖205、复配多糖301及其组成多糖,检测其对NO、IL-6、IL-1β分泌的影响。结果发现复配多糖205(茯苓多糖-香菇多糖),复配多糖301(银耳多糖-茯苓多糖-香菇多糖)均可显著提高巨噬细胞的NO、IL-6、IL-1β分泌水平;并且,在合适剂量条件下,复配多糖205促进IL-6、IL-1β分泌效果仍能显著优于其2种组成多糖;复配多糖301在浓度为80μg/mL促进NO分泌效果显著优于其3种组成多糖。 综上所述,银耳多糖、茯苓多糖、香菇多糖、猴头菇多糖和竹荪多糖及其复配多糖均具有免疫调节作用,并且适当的复配可产生协同作用,从而增强多糖的免疫调节作用,例如由茯苓多糖和香菇多糖按1∶1复配得到的多糖,其作用效果优于组成多糖单独作用。将不同多糖复配,突破单一多糖的功效限制,是充分发挥多糖功效、开发多糖产品的新方式。本论文采用复配的方式,试图找出免疫调节作用更显著的多糖,以期多糖产品更好地为人类健康服务。