摘要
目的：通过比较咔唑氨基醇类H1424原药与其新型纳米制剂、阿苯哒唑原药经口灌胃治疗泡型棘球蚴病小鼠的治疗效果，评价H1424原药及其新型纳米制剂的药效。同时，再通过免疫组化和代谢组学实验两个方面，深入探讨药物对泡型棘球蚴小鼠的体内作用机制。 方法：雌性昆明小鼠60只，采用腹腔注射的方法建立泡型棘球蚴小鼠模型，16周后，随机分为6组，每组10只小鼠，咔唑醇类H1424原药及纳米制剂高低剂量组分别按100mg/kg/d、50mg/kg/d给药，阿苯哒唑原药组按50mg/kg/d给药，模型组每天给予0.2ml羧甲基纤维素溶液(CMC)灌胃，另取10只雌性昆明小鼠做空白对照组，每天予以0.2mlCMC溶液灌胃，置于同一培养环境中，持续30天。治疗结束2周后，剖检小鼠观察各组治疗效果。药效评价指标如下：（1）病理组织大体形态观察；（2）包囊湿重及抑囊率；（3）观察包囊超微结构改变；（4）小鼠毒理及生化指标变化。同时，通过二氨基联苯胺（DAB）染色法进行血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤微血管密度（MVD）两项指标的免疫组化实验，通过液相色谱-质谱联用技术对模型组、H1424原药组及其载体药物组进行代谢组学实验，综合二者结果，探究药物作用机制。 结果：1.各药物实验组包囊重量较模型组均有下降，H1424原药低、高剂量组及其载体药物低、高剂量组抑囊率分别为76.67%、79.63%、86.04%、86.60%，均高于阿苯哒唑原药组的61.89%；2.经透射电镜观察各药物组与模型组的小鼠棘球蚴囊超微结构，发现各药物组的角质层、生发层及微绒毛结构均有不同程度的损伤;3.小鼠血液各方面生化指标均正常，各脏器病理检查未见明显异常;4.VEGF及MVD-CD34在模型组及各药物实验组中均存在强阳性表达，各药物实验组两项指标较模型组都有不同程度的下降，但各组间表达差异不明显，无统计学意义；5.基于LC-MS非靶向代谢组学技术确定了差异显著的代谢物18种，差异代谢物包含胆碱、磷脂酸、DHA、亚油酸、长链酸等一系列代谢物。 结论：1.咔唑氨基醇类H1424原药及其新型纳米载体制剂对于泡型棘球蚴病小鼠的体内治疗是显著有效的，且无明显副作用，有望成为一种治疗泡型棘球蚴的新药；2.通过LC-MS非靶向代谢组学技术总共筛选出了18个能够良好区分AE个体和转归个体的代谢物。这些代谢物主要涉及了甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、花生四烯酸代谢三条代谢通路，这些代谢物变化及涉及的代谢通路可以为以后AE药物靶点开发提供新的思路。3.5.PE(22:6)、13R-HODE等10种代谢物的组合模型具有将患病小鼠模型和干预后恢复小鼠模型进行区分的潜力，也说明这些差异代谢物在AE的恢复过程中可能具有潜在作用；4.在AE的疾病发展过程中，会诱导机体产生畸形的Th2应答，抑制Th1应答，使Th1/Th2之间比例失衡，新型咔唑氨基醇类纳米制剂则会使机体的免疫应答趋于恢复正常。
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