摘要
兽医针灸有两千多年的历史，是中华民族优秀的文化遗产。便秘是常见消化系统疾病，而针灸是治疗便秘的优势疗法。目前有大量穴位应用于临床治疗便秘，并且针灸对便秘的疗效已经得到证实，但是不同穴位机理研究还处于初期阶段。本试验选择洛哌丁胺诱导大鼠便秘，通过白针后海穴(GV-1)、后三里穴(ST-36)、大肠俞穴(BL-25)治疗，探讨三个穴位对洛哌丁胺诱导大鼠便秘的缓解机理，为针灸临床治疗动物便秘提供理论基础。 将20只SPF级健康SD大鼠随机分成4组，对照组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组、模型Ⅲ组。模型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组大鼠1～13d每日灌服洛哌丁胺混悬液(3mg/kg/d、6mg/kg/d、9mg/kg/d)，对照组大鼠在同样条件下灌服等体积生理盐水。试验期间观察大鼠体征状况，统计体重、粪便含水量、首粒黑便时间、粪便粒数及20粒粪便长度。确定造模时间和剂量后，探索GV-1、ST-36、BL-25对便秘的治疗效果及作用机理，选取SPF级健康SD大鼠60只，随机分为6组。对照组(A组)、模型组(B组)、西药治疗组(C组)、GV-1组(D组)、ST-36组（E组）、BL-25组（F组）。除A组外，其余5组大鼠每只每天灌服3mg/kg/d洛哌丁胺，建立便秘模型。5d后，出现明显便秘症状确定造模成功。在继续应用洛哌丁胺的基础上，C组灌服莫沙必利1.38mg/kg/d混悬液，D、E、F组分别针刺GV-1、ST-36、BL-25各30min。连续治疗7d，记录体重及便秘指标。治疗第8d，将各组大鼠麻醉后，采用BL-420F生物系统测定结肠肌电，测小肠推进率，心脏采血后颈椎脱臼处死，立即摘取结肠前段组织。检测血清及结肠中胃肠运动相关神经递质及5-HT通路上相关因子。 针刺三个穴位结果表明，针刺GV-1血清中5-HT、SS含量分别下调6.19ng/mL、6.17pg/mL（P＜0.01）:显著上调结肠组织中5-HT3R、5-HT4RmRNA相对表达量;结肠TPH蛋白表达水平极显著下调，结肠SERT蛋白表达水平上调（P＜0.01）;结肠5-HT蛋白表达水平下调29.16％（P＜0.01）;加快结肠慢波的频率和加强振幅(P＜0.05);改善肠道结构;改善胃肠动力。针刺双侧ST-36血清中5-HT、SS含量分别下调23.93％、13.46％:5-HT3R、5-HT4RmRNA相对表达量分别上调40.98％、65.52％(P＜0.05);结肠中SERT蛋白表达水平上调50％(P＜0.01);结肠5-HT蛋白表达水平显著下降;减轻肠道结构损伤，增加杯状细胞个数。针刺双侧BL-25血清中5-HT含量下调(P＜0.05):血清中VIP、SP含量分别增加27.48％、22.75％(P＜0.05或P＜0.01);结肠中5-HT4R相对表达量增加37.93％:结肠中TPH蛋白表达水平下调55％，结肠SERT蛋白表达水平上调40％(P＜0.01);下调结肠5-HT蛋白表达水平23.88％;加快慢波频率;改善肠道结构。 结论:大鼠连续5天应用3mg/kg/d洛哌丁胺可以获得稳定的便秘模型;GV-1、ST-36、BL-25均能够缓解便秘症状，但是缓解便秘机理不同;GV-1治疗便秘效果优于ST-36和BL-25。
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