摘要
我国有9915万hm2盐碱地，其中沿黄盐碱地有666.7万hm2。沿黄盐碱地渔业长期以来以鱼类养殖为主，养殖模式单一，养殖密度过高，养殖病害日益严重，污染加剧，加之低盐碱生态适应性养殖品种缺乏，使沿黄水产养殖发展遇到了瓶颈。脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)是海水长臂虾科的代表种，肉质细嫩，风味鲜美，具有生长速度快、耐低盐等优点，可在水体盐度4-35水体中正常生长，通过逐级淡化可在纯淡水中生存，是内陆低盐碱水域可移植驯化的优良品种。 本研究拟阐明河南地区沿黄盐碱水域水质特点，针对不同地域、不同水质特点研发脊尾白虾盐碱水域驯化技术，探究低盐碱条件、不同钙镁比例对脊尾白虾变态发育、抗氧化酶活力、渗透压调节相关酶及基因表达的影响，以期为脊尾白虾沿黄盐碱水域养殖提供理论依据与技术支持。主要研究结果如下： 1、河南省沿黄盐碱水质特点调查与分析 本章研究了河南沿黄郑州、新乡、开封、濮阳4个地区的井水和池塘水质特点，测定了了pH、盐度、硬度、Na+、K+离子含量等指标。结果表明，河南沿黄4个采集点水样 pH值范围为6.96~9.07，盐度为0.5~2.73，硬度为4.36~22.34mmol/L，碱度为4.6~13.64mmol/L，碱度主要由 HCO3-组成。阳离子以 Ca2+、Mg2+和 Na+为主，K+含量较低。 2、不同盐度及钙镁比例对脊尾白虾幼体变态发育的影响 本章研究了15、10、5盐度和5盐度下不同钙镁比例对脊尾白虾幼体的变态发育的影响。研究结果显示，幼体孵化后14天，15、10盐度组全部变为仔虾；在15天时，5盐度组全部变为仔虾。全部变为仔虾时15、10、5盐度组存活率分别为71.00%、74.00%、78.56%。在盐度5下，钙离子浓度为50 mg/L时，1∶1.5、1∶2.5组在第12天时全部变为仔虾，1∶3组第13天时全部变为仔虾，1∶1、1∶2组第14天时全部变为仔虾。全部变为仔虾时1∶1、1∶1.5、1∶2、1∶2.5、1∶3组存活率分别为18.75%、65.00%、56.25%、60.00%、67.50%；钙离子浓度为80 mg/L时，1∶2.5组在第12天时全部变为仔虾，1∶1.5、1∶3组第13天时全部变为仔虾，1∶1组第14天时全部变为仔虾。全部变为仔虾时1∶1、1∶1.5、1∶2、1∶2.5、1∶3组存活率分别为28.09%、66.25%、58.75%、78.56%、63.33%。 3、脊尾白虾仔虾低盐碱驯化技术研究 本实验研究了脊尾白虾仔虾低盐碱驯化技术。首先按照10→7→5→3→2→1、10→5→3→2→1、5→2→1、5→1盐度梯度逐天降低盐度，盐度1水体中72h存活率为100%；然后按照2→4→5→6、2→6mmol/L碳酸盐碱度梯度逐天升高碱度，盐度1碱度6水体中72h存活率为100%。结果表明，脊尾白虾仔虾经过驯化可以在低盐碱水体中生存。 4、不同钙离子浓度下钙镁比例对脊尾白虾幼虾生长及酶活性的影响 本实验设置30、40、50mg/L3个钙离子浓度组，每个浓度下分别设置1∶1、1∶1.5、1∶2、1∶2.5、1∶3钙镁比例，在上述水体中进行脊尾白虾仔虾4周养殖。养殖结束后统计存活率和增重率，测定 T-SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC、AKP、ACP、Na+-K+-ATP、Ca2+-ATP酶的活性。结果显示，各实验组脊尾白虾幼虾存活率均在70.0%以上，增重率均高于397%。钙离子浓度30、40、50mg/L，T-SOD酶活性在钙镁比例1∶2-1∶2.5时活性最高。钙离子浓度30mg/L，CAT酶活性在钙镁比例为1∶2时活性最高，40mg/L时，钙镁比例1∶2.5时活性最高。钙离子浓度30mg/L时，钙镁比例1∶3时GSH-Px活性最高，与1∶2组无显著性差异（P＞0.05）；钙离子浓度40、50mg/L时，钙镁比例1∶2时活性最高。钙离子浓度为30、50mg/L时，钙镁比例1∶1.5时T-AOC活性最高；钙离子浓度40mg/L时，钙镁比例1∶2时活性最高。钙离子浓度30mg/L时，钙镁比例1∶1.5时ACP、AKP活性最高；钙离子浓度为40mg/L，钙镁比例为1∶2时ACP、AKP活性最高；钙离子浓度50mg/L时，钙镁比例1∶2.5时AKP活性最高，钙镁比例1∶2时ACP活性最高。钙离子浓度30、40、50mg/L，Na+-K+-ATP酶活性在钙镁比例1∶2时最低（P＜0.05）， Ca2+-ATP酶活性分别在钙镁比例为1∶3、1∶1.5、1.1时最高（P＜0.05）。 5、低盐度下碳酸盐碱度胁迫对脊尾白虾V-H+-ATPase、Na+-K+-ATPase表达的影响 本实验通过RACE技术获得了脊尾白虾V-H+-ATPase基因，分析了其生物信息学。碳酸盐碱度胁迫后3、6、12、24、48、72h和8周，荧光定量检测鳃和肝胰腺中V-H+-ATPase、Na+-K+-ATPase的表达量。实验结果显示，脊尾白虾 V-H+-ATPase基因 cDNA全长2405bp，开放阅读框（ORF）1470bp，5’非编码区32bp，3’非编码区902bp，共编码489个氨基酸。氨基酸序列比对发现，脊尾白虾V-H+-ATPase在进化上与其他甲壳类动物一致性达95%以上，与凡纳滨对虾亲缘关系最近。脊尾白虾V-H+-ATPase基因在各组织中均有表达，其中在鳃中表达量最高，肝胰腺次之。碳酸盐碱度胁迫6、12、72h以及8周，胁迫组鳃V-H+-ATPase相对表达量显著高于对照组（P＜0.05）；胁迫72h时，胁迫组鳃Na+-K+-ATPase基因显著高于对照组（P＜0.05），8周后无显著性差异（P＞0.05）。胁迫3、6h和8周，胁迫组脊尾白虾肝胰腺 V-H+-ATPase表达量显著高于对照组（P＜0.05）；胁迫3-72h，胁迫组脊尾白虾肝胰腺Na+-K+-ATPase表达量显著高于对照组（P＜0.05），8周后与对照组相比无显著性差异（P＞0.05）。
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