摘要
目的: 探讨长链非编码RNA(Longnon-codingRNA，LncRNA)Co7Rik的表达特征及其在肝脏糖异生中的作用。 方法: 1)构建饥饿-再进食模型及高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型，RT-PCR法检测LncRNA-Co7Rik的表达水平; 2)取小鼠心、肝、脾、肺、肾等不同部位的组织，RT-PCR法检测LncRNA-Co7Rik的组织表达规律; 3)利用UCSC基因组浏览工具对LncRNA-Co7Rik的序列进行分析，并且使用核酸电泳对其序列进行鉴定; 4)分离培养小鼠肝脏原代细胞，给予二丁酰环腺苷酸(db-cAMP)、腺苷酸环化酶激活剂(Forskolin)、地塞米松(Dexamethasone)、氢化可的松(Hydrocortisone)四种不同的生糖信号分子刺激，RT-PCR法检测LncRNA-Co7Rik的表达变化; 5)利用核质分离的技术，检测LncRNA-Co7Rik的亚细胞定位。 结果: 1)饥饿-再进食模型结果显示:LncRNA-Co7Rik在饥饿0h、2h、5h、16h及再进食20h的表达量分别为1.00±0.61、2.98±0.87、3.41±0.98、6.73±1.21、1.53±0.78（均P＜0.05），表明LncRNA-Co7Rik的表达水平会随着饥饿时间的延长而显著升高，且在再进食后可接近饥饿前水平; 2)高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏中LncRNA-Co7Rik的表达较正常对照组明显升高（1.00±0.21vs2.92±0.63，P＜0.01），提示LncRNA-Co7Rik对病理性的糖异生具有调控作用; 3)小鼠不同组织的定量结果表明LncRNA-Co7Rik在肝脏组织中特异性高表达，表达量是其他的3-4倍(P＜0.05); 4)小鼠LncRNA-Co7Rik序列所在的染色体区域为Chr8qA1.1，全长1202bp，且利用核酸电泳后测序发现与数据库中序列一致，证实这段序列是真实存在的; 5)利用二丁酰环腺苷酸、腺苷酸环化酶激活剂、地塞米松及氢化可的松四种生糖信号分子刺激原代肝细胞，结果表明LncRNA-Co7Rik的表达明显上调，且具有时间依赖性，提示LncRNA-Co7Rik可能参与糖异生的生理及病理过程; 6)核质分离结果表明LncRNA-Co7Rik在细胞核和细胞质中均有分布，但主要分布于细胞核中，提示LncRNA-Co7Rik可能在基因转录水平发挥作用。 结论: LncRNA-Co7Rik是一个肝脏特异性的长链非编码RNA，且受生糖信号的调控，并可能参与糖异生的生理及病理过程。
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