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野生欧洲李组织培养体系试验研究

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野生欧洲李(PrunusdomesticaL.),属于蔷薇科(Rosaceae)李属(Prunus)植物,是新疆天山野果林中珍稀的野生果树资源之一。当前,由于受到人类活动和自然环境的影响,该资源的生存环境受到严重破坏,种群数量逐年减少,现状岌岌可危。而组织培养技术是一种快速有效的育种方法,在保护遗传资源和增加濒危植物的种群数量方面发挥着重要作用。因此,本研究利用组织培养技术对野生欧洲李茎段、叶片、叶柄和种子这4种外植体进行研究,筛选出最适培养程序,并对比总结这4种外植体培养结果中所存在的问题。为以后建立健全野生欧洲李再生体系和再生植株提供参考依据。主要研究结果如下: (1)野生欧洲李茎段在5月至6月中旬取材;最佳消毒方法为75%酒精消毒60s+0.1%HgCl2消毒7min,存活率为85.5%;3种碳源对不定芽诱导能力依次为蔗糖>葡萄糖>D-果糖,其中30g/L蔗糖为最佳的蔗糖浓度选择:适合野生欧洲李茎段初代培养配方为WPM+2.0mg/LTD2+0.4mg/LIBA,不定芽诱导率为91.67%;不定芽增殖配方为WPM+0.7mg/LTD2+0.4mg/LIBA,增殖系数为5.23;生根培养配方为1/2MS+0.4mg/LIBA+0.3mg/LNAA,生根率为36.67%。 (2)在进行野生欧洲李叶片培养时,叶片反放有利于诱导愈伤组织,出愈率为100%,叶片不同部位的诱导能力依次为叶片基部>中部>上部。野生欧洲李野外采摘叶片暗培养14d和组培苗叶片暗培养21d后;在B5培养基中,添加0.2mg/L6-BA+2.0mg/LNAA的配方更优于7.5mg/LTD2+2.5mg/LIBA,出愈率分别为96.67%和93.33%,且组培苗叶片不定芽诱导率为2.33%,在配方B5+0.7mg/L6-BA+0.3mg/LNAA中可获得少量不定芽。 (3)适合野生欧洲李野外采摘叶柄的最佳消毒方法为75%酒精消毒45s+0.1%HgCl2消毒7min时,最低污染率为3.33%;暗处理14d时,愈伤组织诱导及增殖最优配方为B5+0.2mg/L6-BA+2mg/LNAA。野生欧洲李组培苗叶柄经暗培养21d,适合初代培养的配方为B5+0.2mg/L6-BA+1.5mg/LNAA,不定芽诱导率为30.0%;适合增殖培养的配方为B5+0.7mg/L6-BA+0.3mg/LNAA,增殖系数为2.8;适合生根培养的配方为B5+0.5mg/LIBA,生根率为20.0%。 (4)野生欧洲李种子用75%酒精消毒60s+0.1%HgCl2消毒5min后,直接光照培养和进行剥皮处理(半剥皮和全剥皮)有利于萌发。野生欧洲李种子在WPM和MS培养基上培养可诱导种子萌发,萌芽率为5.0%;在WPM+0.2mg/LNAA+0.5mg/L6-BA和MS+0.1mg/LIBA+2.0mg/L6-BA的配方中均能诱导种子的萌发,萌发率为2.5%:增殖培养配方为B5+0.2mg/LNAA+2.0mg/L6-BA,增殖系数可达11.8;在配方1/2MS+0.5mg/LIBA中可诱导生根。

陈曦

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野生欧洲李 组织培养 程序优化 种群保护

硕士

园艺学

耿文娟

2021

新疆农业大学

中文

S6