摘要
胃泌素释放肽(Gastrin-releasingpeptide，GRP)因具有促进胃泌素(Gastrin，GAS)分泌的作用而得名，其生物学作用主要通过特异性受体(Gastrin-releasingpeptidereceptor,GRPR)介导。本团队之前研究表明静脉注射胃泌素可促进牛生长激素(Growthhormone，GH)分泌。因而，GRP也可能影响GH的分泌。为了探究GRP是否影响反刍动物GH的分泌，本研究分析了GRP及其受体的氨基酸序列，检测了GRP和GRPR基因在羊各组织中的表达量，用在体注射试验和离体垂体细胞培养试验探究GRP对GH分泌的影响，以期为GRP调控反刍动物生长发育研究提供理论依据。 (1)根据Uniprot数据库中发布的GRP氨基酸序列分析结果显示，牛、羊、人、猪、豚鼠、狗、虹鳟鱼、金鱼和马羧基端的10个氨基酸序列(即神经介素C，NeuromedinC，NMC)完全相同。GRP特异性受体GRPR进化树分析显示，猪与马、牛与狗、大鼠与小鼠、鸡与美洲短吻鳄在进化树上相距最近，并且均分别来源于同一分支。牛GRPR与NMBR氨基酸序列相似性为62.2％。 (2)运用qRT-PCR方法检测了GRP和GRPR基因在4只新疆细毛羊不同组织中的相对表达量，结果显示GRP基因在肾脏中相对表达量最高，且显著高于其它组织(P＜0.05);GRPR基因在结肠中表达量最高，其次为垂体，且显著高于其它组织(P＜0.05)。 (3)离体细胞培养试验结果显示，牛原代垂体细胞接受1.0×10-7moL/LNMC处理后4h上清液中GH水平极显著高于对照组(P＜0.01)，而1.0×10-9moL/L浓度处理差异不显著(P＞0.05)。 (4)5头荷斯坦牛在体注射试验表明，一次性静脉注射0.9nmol/kgGRP后5min～15min和20min血浆GH水平分别极显著(P＜0.01)和显著(P＜0.05)高于对照组，而注射同剂量NMC后仅在5min内血浆GH水平极显著高于对照组(P＜0.01)，注射后其它时间点差异均不显著(P＞0.05)。受体阻断试验结果显示，NMC单独注射后5min血浆GH水平同注射前比较显著升高(P＜0.05)，但是NMC与GRP受体特异性阻断剂联合用药血浆GH水平同注射前比较差异不显著(P＞0.05)。 以上研究结果提示，GRP可能通过其特异性受体GRPR调控反刍动物生长发育，且其生物活性部位主要位于其氨基酸序列羧基端。
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