摘要
鸽毛滴虫病是由鸽毛滴虫引起的一种鸽常见原虫病，各品种、性别、年龄鸽子均可发病，轻度感染也可引起其生产性能下降，给养鸽业造成严重经济损失。因此，筛选出1种灵敏度高且简单便捷的检测方法，可尽早发现鸽毛滴虫感染并探明该病流行传播规律，以便及时采取相应措施，从而更好地防控鸽毛滴虫病的发生。本论文以此为目标，首先通过实验比较筛选出1种简易的鸽毛滴虫检测方法；其次探究毛滴虫在鸽场环境物料中存活时间等体外存活特性；最后对广东省部分地区规模化鸽场进行毛滴虫流行病学调查，探明鸽毛滴虫病流行感染规律，为防控该病提供指导。 实验第一部分是筛选鸽毛滴虫检测方法，通过直接镜检法、培养-镜检法、PCR检测法3种检测方法对部分样品进行毛滴虫检测，并比较其阳性检出率，建立了1种灵敏度高且简易便捷的检测方法。结果显示，同样的待检样品，采用直接镜检法，在100倍显微镜视野下能看到游动毛滴虫的检出率仅为20.0%；采用培养-镜检法，在100倍显微镜视野下能看到游动毛滴虫的检出率为38.3%；而PCR检测方法阳性检出率为40.0%。综合考虑各种因素，三种检测方法中以采用培养-镜检法开展鸽场毛滴虫感染调查为佳。 实验第二部分是将鸽毛滴虫繁殖纯化，进行毛滴虫在环境物料中的存活特性研究。结果显示，鸽毛滴虫在25℃、30℃、37℃和40℃不同温度条件下，37℃时毛滴虫繁殖性能最好，初始密度为2×104个/mL鸽毛滴虫在培养基中增殖12h，计得其数量为62×104个，24h为93.4×104个，30h为125.2×104个；在pH4.0、pH5.0、pH6.0、pH7.0、pH8.0、pH9.0和pH10.0共7种不同酸碱度条件下，毛滴虫在pH7.0时，繁殖性能最好，初始密度为2×104个/mL的鸽毛滴虫在培养基中增殖17h，计得鸽毛滴虫数量为69×104个，23h为87.36×104个，29h为127.92×104个。37℃，pH7.0对毛滴虫进行培养、计数并绘制生长曲线，结果显示24h内鸽毛滴虫繁殖速度快，在24h时达到峰值为56×105个/mL，在132h时毛滴虫全部死亡；将毛滴虫添加到饮水和饲料中，观察毛滴虫存活情况，结果显示，毛滴虫在饮水和饲料中存活时间均不超过5h。 实验第三部分是对2019～2020年间广东省广州市、佛山市、河源市、开平市、江门市、肇庆市、英德市6个地区的9个集约化养殖场的鸽毛滴虫感染情况进行调查。采取随机抽样的方法，采集到含生物媒介在内的环境物料样品247份，毛滴虫阳性率为1.21%；采集到口腔黏液样品462份，毛滴虫阳性率为30.7%。对这些样本进行分析的结果显示，不同的地区中，河源地区和佛山地区的鸽毛滴虫感染率最高，分别为60.0%和50.0%，肇庆地区的感染率为41.1%，江门地区为36.5%，广州和清远鸽毛滴虫感染率相对较低，分别为20.0%和15.7%；在不同日龄鸽群中，青年鸽的毛滴虫感染率最高，为53.3%，乳鸽次之，为33.2%，种鸽的毛滴虫感染率最低，为12.4%；对分离的毛滴虫样品进行基因型分析，发现广东省鸽毛滴虫的基因型主要为A型和B型；不同管理条件中，种鸽引进方式为自繁自养，环境温湿度及时进行调控和用药消毒频率合理的，毛滴虫感染率较低。 综上所述，本研究筛选出1种简易便捷的鸽毛滴虫检测法；对其体外存活特性研究发现鸽毛滴虫在37℃，pH7.0时体外培养效果最好，在饮水及饲料中最长存活时间不超过5h；在对鸽毛滴虫的流行病学调查中，发现在饮水、饲料、保健砂等环境物料中存在活的鸽毛滴虫，提示鸽子可能通过环境物料间接感染鸽毛滴虫。本研究为科学防控鸽毛滴虫病提供了方法及有效参考数据。
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