摘要
研究背景及目的: 结直肠癌是全球第三大常见的恶性肿瘤，2018年大约有88.1万人的死于结直肠癌。因此，深入研究结直肠癌发生发展过程的相关机制具有重要的临床意义。SNX16(Sortingnexin16)属于分选连接蛋白(sortingnexins，SNXs)家族的一员。研究提示SNX16与肿瘤的发生发展关系密切。基因芯片表达谱分析发现SNX16基因在膀胱癌患者血细胞中过度表达。全基因组关联研究荟萃分析发现卵巢癌与正常组织相比SNX16显著高表达。ShaTao等研究发现SNX16与32个已知前列腺癌风险SNPs相互作用。但SNX16在结直肠癌中所扮演的角色及所涉及的下游分子机制有待明确。 在本研究中，我们试图分析SNX16在结直肠癌中的表达情况和临床意义，探索SNX16在体内外对结直肠癌细胞功能的影响，以及SNX16所激活的下游分子信号通路，为探讨SNX16在结直肠癌中的促癌机制提供可靠的实验依据。 研究方法: 1.利用GEO数据库和Oncomine数据库的肠癌数据集对SNX16在结直肠癌中的表达特征进行外源性验证，并分析SNX16表达情况与结直肠癌患者生存预后的关系。 2.利用Westernblot、qRT-PCR及IHC对SNX16在人结直肠癌中的表达情况进行了分析。 3.构建SNX16敲低及过表达细胞株，通过MTT细胞增殖实验、克隆平板实验、裸鼠皮下成瘤模型、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡等技术，探索SNX16在结直肠癌细胞增殖及凋亡中所扮演的角色。 4.通过LC-MS/MS蛋白质质谱分析、免疫共沉淀（Co-IP）、免疫荧光(IF)、放射菌酮蛋白示踪实验、体外泛素化实验、基因集富集分析(GeneSetEnrichmentAnalysis，GSEA)等技术，探寻SNX16所涉及的下游分子机制。 实验结果: 1)SNX16在结直肠癌中过表达且与不良预后相关。 2)SNX16促进结直肠癌细胞体外增殖和体内肿瘤发生。 3)SNX16表达下调可诱导结直肠癌细胞发生细胞周期阻滞和凋亡。 4)SNX16激活c-Myc信号通路继而促进结直肠癌细胞增殖。 5)SNX16与癌蛋白eEF1A2存在相互作用。 6)SNX16通过抑制eEF1A2蛋白泛素化降解继而激活c-Myc信号通路。 结论: SNX16在结直肠癌组织中过表达，并且与更晚的TNM临床分期和不良的生存预后相关。SNX16通过抑制eEF1A2的泛素化降解，并随后激活c-Myc信号通路，从而发挥促进肿瘤增殖的作用。我们的研究提示SNX16可能是抑制结直肠癌失控增殖的一个潜在的治疗靶点。
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