摘要
土地盐渍化是我国面临的严重土壤问题之一，而我国是一个人口大国，人均占有的土地面积较小，粮食供应不足，迫切需要利用盐渍化土壤。 “南盐油1号”甘蓝型油菜广泛种植在江苏省沿海滩涂，具有含油量高，耐盐等优点。前期研究发现油菜中核转录因子Y家族的A亚基成员BnNF-YA9对胁迫具有抗性，而且在研究中还发现它们受到油菜中的小RNA分子中的microRNA169n成员的调控。为进一步研究microRNA169和BnNF-YA9在植物逆境胁迫下的功能，我们开展了研究，主要结果如下: 对过表达microRNA169n和过表达BnNF-YA9的拟南芥在干旱、盐以及ABA处理下进行转录组分析，以辨别其耐逆机理。本实验共检测出26904个基因，干旱处理下的差异基因要比盐胁迫的多。其中有7081个得到GO注释，其在细胞组分主要分布在细胞(cell)和细胞部分(cellpart)，在生物过程组分主要富集在化学响应(responsetochemical)和胁迫反应(responsetostress)。其中有3331个得到KEGGPathway注释，相比较对照，在干旱处理中:主要富集在Circadianrhythm-plant（植物昼夜节律)代谢通路中。在盐处理中:A9主要富集在Flavonoidbiosynthesis（类黄酮生物合成）代谢通路中，169n富集通路有Glucosinolatebiosynthesis（芥子油苷生物合成）和Cyanoaminoacidmetabolism（氰基氨基酸代谢）。在ABA处理中，A9和169n富集通路有Sesquiterpenoidandtriterpenoidbiosynthesis（倍半萜和三萜生物合成途径）。在盐、干旱和ABA处理中共同富集的代谢通路有植物MAPK信号通路(MAPKsignalingpathway-plant)和植物激素信号转导(Planthormonesignaltransduction)，在这个通路中主要是ABA信号转导途径来调控植物抵抗外界不良环境，在ABA信号转导途径有三个主要部分:PYR/PYL、PP2C和SnRK2，其中编码PYR/PYL的差异基因中表达量上调的有AT4G18620和AT5G45870，表达量下调的有AT1G73000、AT4G01026、AT5G05440、AT2G40330和AT4G27920;在编码PP2C的差异基因中表达量上调的有AT1G07430、AT1G72870、AT2G29380、AT3G11410、AT4G11040、AT5G57050和AT5G59220，表达量下调的有AT1G07430、AT1G72770、AT5G59220、AT1G17610、AT1G17615、AT1G72910、AT2G07599;编码SnRK2的差异基因中表达量上调的有AT5G63650和AT2G23030，表达量下调的有AT3G50470。对差异表达的转录因子进行分析发现，其中MYB家族、AP2/EREBP家族和bHLH家族占有较大比例，许多报道证明这些家族的成员能够响应非生物胁迫。 将野生型和过表达BnNF-YA9拟南芥在干旱、盐处理下测定其生理生化指标，在超氧化物歧化酶活性的测定中，干旱处理下的过表达BnNF-YA9与CK（对照）中WT（野生型）相比有明显差异。在丙二醛的测定中发现在盐和干旱处理中过表达BnNF-YA9与CK中WT中含量相比均有显著性差异。在过氧化物酶活性的测定中，盐和干旱处理中过表达BnNF-YA9与CK中WT中含量相比均有显著性差异。在过氧化氢酶活性的测定中发现，盐和干旱处理中过表达BnNF-YA9与CK中WT中含量相比均有显著性差异。脯氨酸含量的测定中，盐和干旱处理中过表达BnNF-YA9与CK中WT中含量相比均有显著性差异。在叶绿素和总糖的测定中，无论是干旱还是盐处理下，过表达BnNF-YA9与CK中WT中含量相比均有显著性差异。这说明过表达BnNF-YA9拟南芥表现出了对干旱和盐害的耐受性。
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