摘要
目的: 基于不同细胞骨架力学信号生物传导途径,观察毫针针刺力学刺激对腧穴生物热学特点、电学特性及能量代谢特征的影响,明确腧穴针刺效应启动作用表现,探讨细胞骨架微丝、微管力学信号生物传导途径干预启动针刺效应的机制差异,探寻毫针针刺力学刺激信号传导的主要细胞骨架力学信号生物传导途径,进一步揭示毫针针刺作用的非神经生物学机制,为毫针针刺治疗作用的现代生物学机制提供新的实验依据。 方法: 1、以SPF级SD大鼠为实验动物,以“后三里”穴为研究对象,随机分为正常组、正常针刺组(针刺)、微丝解聚组(注射细胞松弛素B)、微丝解聚针刺组(注射细胞松弛素B+针刺)、微管解聚组(注射秋水仙碱)、微管解聚针刺组(注射秋水仙碱+针刺),每天刺激操作1次,共刺激3天。 2、末次刺激后检测“后三里”穴温度、电阻,穴区进一步消毒备皮,切取腧穴局部皮下组织块,用ELISA法检测各组织块中ATP、ADP、AMP含量,计算TAN。 3、所有数据均以均数±标准差表示,采用SPSS21.0统计软件中One-WayANOAY进行检验,比较各组间的差异有无统计学意义,以P<0.05为有统计学意义。 结果: 1、毫针针刺力学刺激沿不同细胞骨架力学信号生物传导途径传导对腧穴温度的影响:针刺可以降低腧穴温度(P<0.05),细胞松弛素B、秋水仙碱是否破坏细胞骨架微丝、微管对腧穴非针刺状态下本身温度没有影响(P均大于0.05),不同细胞骨架破坏后针刺改变腧穴温度的作用没有被阻断(P均小于0.05),且细胞骨架微丝、微管干扰针刺改变腧穴温度的作用相当(P>0.05)。 2、毫针针刺力学刺激沿不同细胞骨架力学信号生物传导途径传导对腧穴电阻的影响:针刺可以降低腧穴电阻(P<0.05),细胞松弛素B、秋水仙碱是否破坏细胞骨架微丝、微管对腧穴非针刺状态下本身电阻有影响(P均小于0.05),不同细胞骨架破坏后针刺改变腧穴电阻的作用都被阻断(P均大于0.05),且细胞骨架微丝、微管干扰针刺改变腧穴电阻的作用相当(P>0.05)。 3、毫针针刺力学刺激沿不同细胞骨架力学信号生物传导途径传导对腧穴能量代谢特征的影响: (1)毫针针刺力学刺激沿不同细胞骨架力学信号生物传导途径传导对腧穴ATP含量的影响:针刺可以增加腧穴ATP含量(P<0.05),细胞松弛素B、秋水仙碱是否破坏细胞骨架微丝、微管对腧穴非针刺状态下本身ATP含量有影响(P均小于0.05),不同细胞骨架破坏后针刺改变腧穴ATP含量的作用没有被阻断(P均小于0.05),但细胞骨架微丝、微管干扰针刺改变腧穴ATP含量的作用不等(P<0.05),解聚微管的干扰大于解聚微丝的干扰(P<0.05)。 (2)毫针针刺力学刺激沿不同细胞骨架力学信号生物传导途径传导对腧穴ADP含量的影响:针刺可以增加腧穴ADP含量(P<0.05),细胞松弛素B、秋水仙碱是否破坏细胞骨架微丝、微管对腧穴非针刺状态下本身ADP含量有影响(P均小于0.05),细胞骨架微丝破坏后针刺改变腧穴ADP含量的作用被阻断(P>0.05),细胞骨架微管破坏后针刺改变腧穴ADP含量的作用没有被阻断(P<0.05),且细胞骨架微丝、微管干扰针刺改变腧穴ADP含量的作用不等(P均小于0.05)。 (3)毫针针刺力学刺激沿不同细胞骨架力学信号生物传导途径传导对腧穴AMP含量的影响:针刺可以增加腧穴AMP含量(P<0.05),细胞松弛素B、秋水仙碱是否破坏细胞骨架微丝、微管对腧穴非针刺状态下本身AMP含量有影响(P均小于0.05),不同细胞骨架破坏后针刺改变腧穴从P含量的作用没有被阻断(P均小于0.05),但细胞骨架微丝、微管干扰针刺改变腧穴AMP含量的作用不等(P<0.05),解聚微管的干扰大于解聚微丝的干扰(P<0.05)。 (4)毫针针剌力学刺激沿不同细胞骨架力学信号生物传导途径传导对腧穴TAN含量的影响:针刺可以增加腧穴TAN含量(P<0.05),细胞松弛素B、秋水仙碱是否破坏细胞骨架微丝、微管对腧穴非针刺状态下本身TAN含量有影响(P均小于0.05),不同细胞骨架破坏后针刺改变腧穴TAN含量的作用没有被阻断(P均小于0.05),但细胞骨架微丝、微管干扰针刺改变腧穴TAN含量的作用不等(P<0.05),解聚微管的干扰大于解聚微丝的干扰(P<0.05)。 结论: 细胞骨架在针刺力学信号感受和传导过程中: 1、解聚细胞骨架微丝、微管不能阻断或显著干扰针刺调整腧穴温度的作用,微丝、微管可能不是针刺激活腧穴改变腧穴生物热学特性的有效途径,针刺信号可能通过其他途径传导毫针对腧穴温度的调节作用; 2、解聚细胞骨架微丝、微管可以阻断针刺调整腧穴电阻的作用,微丝、微管是针刺激活腧穴改变腧穴生物电学特性的有效途径,针刺信号可能主要通过细胞骨架微丝、微管途径传导毫针对腧穴电阻的调节作用,且微丝、微管传导针刺激活腧穴电学特性改变的作用基本相当; 3、解聚细胞骨架微丝、微管可以干扰针刺正常调整腧穴能量代谢物质的作用,微丝、微管是针刺激活腧穴、改变腧穴能量代谢特征的参与途径,针刺信号可能通过细胞骨架微丝、微管途径传导参与毫针对腧穴能量代谢的调节作用,且总体上微管影响能量代谢的程度可能大于微丝的影响; 4、细胞骨架微丝、微管在针刺信号感受传递过程中对腧穴生物热学特点、电学特性和能量代谢特征的影响各不相同,且微丝微管不是针刺信号感受传递的唯一通路。