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米邦塔仙人掌成分分析和生物活性研究及化妆品中10种植物组分HPLC法测定

金唯一

米邦塔仙人掌成分分析和生物活性研究及化妆品中10种植物组分HPLC法测定

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  • 1. 河北医科大学
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摘要

(一)米邦塔仙人掌成分分析及生物活性研究 第一部分基于UHPLC-QE-MS法米邦塔仙人掌提取物定性分析 目的:利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UHPLC-QE-MS)鉴别米邦塔仙人掌各部位(叶状茎表皮、叶肉、果皮和果汁)的主要成分。 方法:本实验采用加热回流的提取方法,以清除DPPH为指标,确定了米邦塔仙人掌各部位的最佳提取溶剂;采用高分辨率、高灵敏度的UHPLC-QE-MS技术在正、负离子模式下,对米邦塔仙人掌叶状茎表皮、叶肉、果皮和果汁四部分的化学成分进行了系统的定性分析。 结果:米邦塔仙人掌叶状茎表皮、叶肉和果皮的最佳提取溶剂分别为水、70%乙醇和50%乙醇,果汁直接应用;在米邦塔仙人掌各部位中共鉴定了66种化合物,负离子检测模式下41种,正离子检测模式下26种,其中芦丁在正、负离子模式下均检出,主要是有机酸和黄酮类化合物。在叶状茎表皮、叶肉、果皮和果汁中番石榴酸(piscidicacid)含量较多,黄酮类化合物主要存在于叶状茎表皮和果皮中。 结论:本实验首次对米邦塔仙人掌的化学成分进行了系统的定性分析,为其日后的开发利用提供了科学依据。 第二部分基于分光光度法米邦塔仙人掌提取物的定量分析 目的:测定米邦塔仙人掌各部位中黄酮、多酚、多糖和蛋白质的含量。 方法:采用分光光度法,对米邦塔仙人掌各部位粗提物中的黄酮、多酚、多糖和蛋白质进行定量分析。 结果:米邦塔仙人掌叶状茎表皮、叶肉、果皮和果汁中多糖的含量分别为37.31mg·g-1、24.24mg·g-1、57.15mg·g-1、5.08mg·mL-1,蛋白质的含量为141.45mg·g-1、78.92mg·g-1、193.09mg·g-1、7.77mg·mL-1,多酚含量分别为23.72mg·g-1、11.21mg·g-1、29.70mg·g-1、0.76mg·mL-1,黄酮含量分别为0.01mg·g-1、0.28mg·g-1、3.33mg·g-1、果汁中未检出。 结论:米邦塔仙人掌各部位富含多糖和蛋白质化合物,表明其具有一定的营养价值和潜在的生物活性。 第三部分基于HPLC法米邦塔仙人掌两种主要成分定量分析及生物活性评价 目的:定量分析米邦塔仙人掌的两种主要化学成分及生物活性。 方法:利用液相色谱法和核磁共振分离和鉴定两个主要化合物,通过HPLC对其进行定量分析;运用体外清除DPPH自由基和羟自由基实验,评价番石榴酸的抗氧化活性;利用体外抑制透明质酸酶活性实验评价其抗敏活性。 结果:从米邦塔仙人掌中分离鉴定出2个化合物,分别是5-羟甲基-2-呋喃甲醛(1)和番石榴酸(piscidicacid)(2),番石榴酸为首次在该植物中分离得到;米邦塔仙人掌叶肉粗提物、叶状茎表皮粗提物、果皮粗提物中5-羟甲基-2-呋喃甲醛的含量分别为2.04mg·g-1、0.67mg·g-1、0.32mg·g-1,果汁中未检测;番石榴酸的含量分别为18.53mg·g-1、45.71mg·g-1、29.01mg·g-1、0.44mg·mL-1;番石榴酸的清除DPPH自由基的IC50值为3692.04μg·mL-1;清除羟自由基的IC50值为66.79μg·mL-1,强于阳性对照维生素C;抑制透明质酸酶活性的IC50值为3662.60μg·mL-1,稍低于阳性对照甘草酸二钾。 结论:米邦塔仙人掌番石榴酸含量较多,且具有较好的生物活性,本实验为米邦塔仙人掌的质量控制提供了参考。 第四部分米邦塔仙人掌生物活性研究 目的:考察米邦塔仙人掌叶状茎表皮、叶肉及其果实中果皮和果汁各部位的抗氧化活性和抗敏活性。 方法:利用大孔吸附树脂分离米邦塔仙人掌叶状茎表皮、叶肉及其果实的果皮的粗体物和果汁不同极性洗脱部位,运用体外清除DPPH自由基和清除羟自由基实验,评价各部位粗提物的抗氧化活性;利用体外抑制透明质酸酶活性实验评价各部位粗提物的抗敏活性。 结果:米邦塔仙人掌果汁清除DPPH自由基和羟自由基的能力最强,其IC50值分别为25.21μL·mL-1和16.13μL·mL-1。经大孔吸附树脂分离,果皮粗提物30%乙醇洗脱物清除DPPH自由基效果较好,其IC50为62.26μg·mL-1,叶状茎表皮粗提物水洗脱物清除羟自由基效果较好,其IC50为81.86μg·mL-1;果汁、果皮粗提取物和叶肉粗提物对透明质酸酶的半抑制率均强于阳性对照甘草酸二钾,其分别为4.31μL·mL-1、387.26μg·mL-1、2337.17μg·mL-1、3445.08μg·mL-1。 结论:本文首次对米邦塔仙人掌叶状茎表皮、叶肉及其果实果皮和果汁各部位的体外抗氧化活性和抗敏活性进行考察,为米邦塔仙人掌作为功能性食品和化妆品原料的开发提供了参考。 (二)化妆品中10种植物组分HPLC法测定 目的:建立化妆品中10种植物组分的高效液相色谱测定方法。 方法:加入适量提取溶剂,涡旋混匀,部分乳状样品加入NaCl破乳,超声30min提取目标组分,以上样品处理后均12000r·min-1,离心5min,取上清液注入HPLC中检测。 结果:对市售的43件宣称含有本实验所检测的10种植物组分的化妆品进行检测。10件不同类型的宣称含有芍药的化妆品中,9件检出含有芍药成分,1件未检出;4件不同类型的宣称含有黄芩的化妆品中,2件检出含有黄芩成分,2件未检出;3件不同类型的宣称含有积雪草的化妆品中,3件检出含有积雪草成分;5件不同类型的宣称含有苦参的化妆品中,2件检出含有苦参成分,3件未检出;6件不同类型的宣称含有当归的化妆品中,均未检出当归成分;7件不同类型的宣称含有复活草的化妆品中,3件检出含有复活草成分,4件未检出;2件何首乌洗发液均未检出何首乌成分;2件不同类型的宣称含有红花的化妆品中,均未检出含有红花成分;1件葛根面膜化妆品,未检出葛根成分;3件不同类型的宣称含有侧柏叶的洗发样品中,2件检出侧柏叶样品,1件未检出。 结论:本文建立了一种方便快速检测化妆品中植物组分的方法。

关键词

米邦塔仙人掌/生物活性/植物组分/HPLC方法/化妆品

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授予学位

硕士

学科专业

卫生检验学

导师

康维钧/石钺

学位年度

2021

学位授予单位

河北医科大学

语种

中文

中图分类号

TQ
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